生物化学实验(第三版)

生物化学实验(第三版)分九章，共50个实验项目，包括糖类物质的检测与分析、脂类物质的检测与分析、氨基酸的检测与分析、蛋白质的分离制备与分析、酶的分离制备与分析、维生素的检测分析、核酸的分离与分析、综合性与设计性实验等常用生物化学实验内容。另外还介绍了生物化学实验的基本知识与基础技能，并在*后附上生物化学实验中常用参数，供实验中参考。 本书适合作为普通高等院校各类理工科专业的生物化学实验课教材或参考书。

曾万勇，男，博士，1996年毕业于西南师范大学生物系本科，获理学学士，1999年毕业于中国科学院成都生物研究所，获理学硕士学位，2002年毕业于四川农业大学，获农学博士业学位。杂攻读硕士学位期间专业为植物生物技术，主要从事植物细胞和分子遗传学方面的研究，研究内容为水稻分子遗传学，构建了水稻雄性不育恢复基因的近等基因系并进行了分子评价。攻读博士学位期间，主要从事植物遗传学和基因组学研究。曾参与中国超级杂交水稻基因组计划。毕业后主要从事植物生物技术研究，曾在泰国正大集团正大生物科学(武汉)研究院生物技术中心任中心主任职，主要负责植物细胞工程和植物分子生物学研究，曾负责并参与了马铃薯脱毒和快速繁殖研究，兰花快速繁殖研究，水稻和玉米组织培养和转基因体系构建。2006年进入武汉工业学院生物与制药工程系工作，担任生物化学、遗传学、细胞工程、生物安全等课程教学工作。目前主要从事植物细胞工程研究，开展经济植物组织培养、快速繁殖和脱毒技术研究，中草药资源快速繁殖，濒危中草药资源的挽救，通过植物生物反应器生产现代中药活性成分研究，中药转基因体系构建和种质创新，资源植物遗传多样性评价及优良种质资源选育等工作。曾参与“乳制品中三聚氰胺的快速检测与试剂”、“油菜QM基因克隆与功能分析”等项目。目前承担校级科研项目一项、横向项目两项、教学项目一项。本人参与的相关研究已经发表论文7篇

目录 第一章实验基本知识与基础技能(1) 第一节生物化学实验室规则(1) 第二节实验室安全和防护知识(2) 第三节基础实验操作技能(6) 第四节实验误差与提高实验准确度的方法(40) 第五节实验记录与实验报告(45) 第二章糖类物质的检测与分析(49) 实验1糖的呈色反应和还原糖的检验(49) 实验2苯酚硫酸法测定总糖浓度(51) 实验3还原糖的测定——3，5二硝基水杨酸比色法(54) 实验4粗淀粉的测定——1％盐酸旋光法(56) 实验5血糖的测定——磷钼酸比色法(59) 实验6可溶性糖的硅胶G 薄层层析(61) 实验项目拓展(64) 第三章脂类物质的检测与分析(65) 实验7粗脂肪含量的测定——索氏抽提法(65) 实验8油脂皂化与皂化值的测定(67) 实验9碘值的测定——韦氏法(68) 实验10血清胆固醇的测定——化学比色法(70) 实验11卵磷脂的提取与鉴定(72) 实验项目拓展(74) 第四章氨基酸的检测与分析(75) 实验12纸层析法分离鉴定氨基酸(75) 实验13甲醛滴定法测定氨基氮含量 (77) 实验项目拓展(79) 第五章蛋白质的分离制备与分析(80) 实验14蛋白质的两性反应与等电点的测定(80) 实验15蛋白质的沉淀反应和颜色反应(82) 实验16蛋白质含量测定(一)——微量凯氏定氮法(MicroKjeldahl法)(87) 实验17蛋白质含量测定(二)(91) Ⅰ双缩脲法(Biuret法)(91) Ⅱ考马斯亮蓝G250法(Bradford法)(93) ⅢFolin酚试剂法(Lowry法)(95) ⅣBCA法(98) Ⅴ紫外(UV)吸收测定法(99) 实验18酪蛋白的制备(102) 实验19凝胶层析法分离蛋白质(104) 实验20血红蛋白的凝胶过滤(106) 实验21蛋白质相对分子质量的测定——SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法(109) 实验22血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳(117) 第六章酶的分离制备与分析(121) 实验23酶的特性——底物专一性(121) 实验24pH值对酶活性的影响(123) 实验25温度对酶活性的影响(124) 实验26血清谷丙转氨酶（ALT）活性的测定(126) 实验27大麦萌发前后淀粉酶活性的测定(128) 实验项目拓展(131) 第七章维生素的检测分析(132) 实验28植物中抗坏血酸含量的测定(132) 实验项目拓展(133) 第八章核酸的分离与分析(134) 实验29植物基因组DNA的提取(134) 实验30酵母RNA的分离与组分鉴定(136) 实验31核苷酸的纸电泳(139) 实验32紫外分光光度法测定核酸的含量(140) 实验33RNA与DNA的测定(143) 实验34定磷法测定核酸含量(145) 实验35DNA的琼脂糖凝胶电泳(148) 实验36质粒DNA的微量制备——碱裂解法、煮沸法(151) 实验37质粒DNA的酶切鉴定及琼脂糖凝胶电泳(156) 实验38质粒DNA的大量制备与纯化(159) 实验39大肠杆菌感受态细胞的制备与转化(162) 实验40PCR基因扩增(167) 实验项目拓展(169) 第九章综合性与设计性实验 (170) 实验41鸡蛋中卵清蛋白的提取和定量测定(170) 实验42纤维素酶活性测定及pH值对其活性的影响(172) 实验43酵母蔗糖酶的纯化及性质研究(176) Ⅰ酵母蔗糖酶的提取与纯化(176) Ⅱ蔗糖酶Km值测定及脲的抑制作用(178) ⅢpH值对酶活性的影响和*适pH值的测定(182) Ⅳ温度对酶活性的影响和反应活化能的测定(185) 实验44正交法测定几种因素对酶活性的影响(187) 实验45固定化酵母细胞及蔗糖酶活性的检测(191) 实验46温度、pH值、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响(193) 实验47溶菌酶结晶的制备及活性测定(196) 实验48橘皮果胶的提取及果冻的制备(200) 实验49蛋白质免疫印迹杂交实验(202) 实验50DNA片段的体外重组(205) 实验项目拓展(207) 附录实验室中常用参数(208) 参考文献(209)