生物工程专业实验指导（中国轻工业“十四五”规划立项教材）

本书共分为10章，内容涵盖实验室规则、常用设备作，以及基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、食品生物技术和生物分离工程等实验项目，还包含生物分子的生物信息分析、分子改造及发酵过程的虚拟仿真等综合实验。在编写过程中，本书注重培养实验研究过程 中的多种能力、素质和创新意识，并有机融入思政元素。作为新形态教材，本书还配套了实验教学视频，便于学生和实验操作人员学习。本书适合作为生物工程、生物技术及相关专业的本科实验教学用书，也可供生物工程相关领域的研究人员作为实验参考。

吴元锋博士、教授、博士生导师，毕业于浙江大学，美国伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校访问学者。担任浙江科技大学生物与化学工程学院副院长，兼任浙江省食品学会青年工作委员会副主任委员、浙江省微生物学会理事等。主要从事植物天然产物提取、生物转化及活性 方面的研究。承担“生物工程专业实验”“分子生物学与基因工程”等课程的教学工作。主持国家和省级项目9项；牵头获得浙江省科学技术进步奖二等奖1项、中国商业联合会科学技术奖一等奖1项，参与获得中国食品工业协会科学技术奖特等奖等6项。发表学术论文60 余篇，其中以第一/通讯作者发表论文48篇；获发明专利授权15件，其中以第一发明人授权7件；参与制定国家标准和团体标准2项；参编教材和专著3部。

第一章 实验室与实验的一般准则 第一节 实验室一般准则 一、 实验室准则要点 二、 实验室基本设施安全使用准则 三、 实验室危险化学品使用准则 四、 实验室生物安全防护 五、 实验室环保准则 第二节 实验开展的一般准则 一、 实验方案确定准则 二、 实验内容确定准则 三、 实验设计准则及方法 第三节 实验数据分析与报告撰写 一、 实验数据分析及方法 二、 实验报告撰写规范 第四节 实验资料及其检索方法 一、 实验室常用工具书 二、 生命科学与生物工程领域主要期刊 三、 生命科学与生物工程重要文献资源 四、 文献及网络信息检索方法 第五节 实验室道德规范 第二章 生物工程实验常用仪器与设备 第一节 分析检测设备 一、 分光光度计 二、 气相色谱仪 三、 液相色谱仪 四、 气相色谱-质谱联用仪 五、 液相色谱-质谱联用仪 第二节 生物制品制备相关设备 一、 发酵设备 二、 提取设备 三、 纯化设备 四、 浓缩和干燥设备 第三节 现代生物技术设备 一、 电泳设备 二、 凝胶成像系统 三、 PCR仪 四、 免疫印迹 五、 酶标仪 六、 流式细胞仪 第三章 基因工程实验 实验 1 PCR 扩增目的基因 实验 2 质粒 DNA 的提取、分离纯化和酶切鉴定 实验 3 感受态细胞的制备 实验 4 重组质粒的连接、转化及筛选 实验 5 目的基因原核表达质粒的构建 实验 6 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 实验 7 表达蛋白的 SDS-PAGE 分析 第四章 细胞工程实验 实验 8 海洋微藻细胞固定化培养技术 实验 9 绿色荧光蛋白的异源表达 实验 10 红曲霉原生质体的制备与显微摄影 实验 11 酿酒酵母的培养与转化 实验 12 植物 (胡萝卜) 的组织培养 实验 13 小鼠肝细胞原代培养 实验 14 细胞传代培养 第五章 酶工程实验 实验 15 产酶菌株的快速分离筛选--―以纤维素酶产生菌为例 实验 16 糖化酶的发酵、提取与酶活力测定 实验 17 果胶酶的发酵、提取与酶活力测定 实验 18 利用亲和层析法从鸡蛋清中分离溶菌酶 实验 19 α-淀粉酶的固定化和酶活力测定 实验 20 红曲霉酯酶同工酶鉴定技术 第六章 发酵工程实验 实验 21 发酵菌种的复壮和保藏 实验 22 大肠杆菌生长曲线的测定 实验 23 发酵污染--―噬菌体的检测 实验 24 l-乳酸发酵 实验 25 丙酮酸发酵 实验 26 柠檬酸发酵 实验 27 枯草芽孢杆菌发酵 实验 28 淀粉酶固态发酵 实验 29 小型连续发酵 第七章 食品生物技术实验 实验 30 甜酒酿发酵 实验 31 干红葡萄酒酿造 实验 32 酱油酿造 实验 33 米醋酿造 实验 34 啤酒发酵 实验 35 特色食药?真菌菌种生产 实验 36 乳酸菌的分离纯化以及凝固型酸乳发酵 实验 37 浓香型杭白菊速溶粉制备 实验 38 纳豆制作及其抗菌性实验 第八章 生物分离工程实验 实验 39 RNA 制备和核苷酸的离子交换层析分离 实验 40 冬虫夏草菌丝培养及胞内多糖的提取 实验 41 膜分离法精制浓缩酶 实验 42 海带中岩藻聚糖硫酸酯的提取 实验 43 食用菌多糖的提取及初步纯化 实验 44 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 实验 45 利用盐析和等电点沉淀法从牛乳中制备酪蛋白 实验 46 离子交换层析分离氨基酸 实验 47 大蒜细胞超氧化物歧化酶的提取与分离 实验 48 双水相体系中蛋白质分配系数的测定 实验 49 离子交换树脂总交换容量的测定 第九章 综合实验：脂肪酶表达载体构建、表达与纯化 实验 50 细菌基因组的提取 实验 51 基因的 PCR 扩增及产物纯化 实验 52 细菌质粒提取 实验 53 载体质粒、PCR产物的双酶切及酶切产物的纯化 实验 54 重组载体的构建及转化 实验 55 重组子的筛选与测序验证 实验 56 基因工程菌菌种的活化及扩大培养 实验 57 基因工程菌发酵工艺 实验 58 发酵过程中残糖、生物量及表达产物含量的测定 实验 59 脂肪酶的表达及分离纯化 实验 60 SDS-PAGE 凝胶电泳 实验 61 脂肪酶活力测定 第十章 综合实验：生物分子的生物信息分析、分子改造及发酵过程的虚拟仿真 实验 62 目的基因的结构鉴别、蛋白质预测和系统发育分析 实验 63 应用拉氏图信息提升谷氨酸脱羧酶的热稳定性 实验 64 乳酸菌发酵生产γ-氨基丁酸过程优化及放大虚拟仿真实验 附录一 常见元素的相对原子质量表 附录二 化学试剂的规格 附录三 法定计量单位和单位换算 附录四 生物工程单元操作实验中的常用数据表 附录五 常用培养基和缓冲液的配制方法 参考文献