临床分子生物学检验技术实验指导(第2版)

第一章　临床分子生物学检验实验室规则及常用仪器/1

第一节　临床分子生物学检验实验守则 / 1

第二节　临床分子生物学检验实验室安全管理制度 / 3

第三节　临床分子生物学检验实验室安全应急预案 / 4

第四节　临床分子生物学检验实验室常用仪器介绍 / 5

第二章　临床分子生物学检验基本技术/9

第一节　核酸的分离、纯化与鉴定技术 / 9

实验一　基因组DNA 的分离与纯化/ 9

实验二　RNA 的分离与纯化/ 13

实验三　质粒DNA 的提取与纯化/ 17

实验四　核酸的鉴定与分析 / 19

第二节　核酸扩增技术 / 29

实验五　PCR 技术 / 29

实验六　RT-PCR 技术 / 33

实验七　荧光定量PCR 技术 / 37

第三节　核酸分子杂交及芯片技术 / 41

实验八　DNA 分子杂交 / 42

实验九　RNA 分子杂交/ 45

实验十　荧光原位杂交 / 48

实验十一　DNA 芯片技术 / 51

第四节　核酸测序及生物信息学分析技术 / 54

实验十二　双脱氧链终止测序法 / 54

实验十三　高通量测序法 / 58

实验十四　测序数据的比对分析 / 61

实验十五　基因功能与通路分析 / 64

第五节　重组DNA 技术 / 66

实验十六　DNA 的限制性核酸内切酶酶切反应 / 67

实验十七　DNA 片段的回收 / 69

实验十八　DNA 的重组连接 / 70

实验十九　感受态细胞的制备及重组子转化 / 72

实验二十　重组子的筛选与鉴定 / 75

第六节　蛋白质组学研究技术 / 81

实验二十一　双向凝胶电泳技术 / 81

实验二十二　蛋白质印迹技术 / 86

第三章　临床分子生物学检验综合性实验/92

第一节　感染性疾病的分子生物学检验 / 92

实验二十三　甲、乙型流感病毒核酸检测 / 92

实验二十四　结核分枝杆菌核酸检测 / 95

实验二十五　人乳头瘤病毒基因分型检测 / 97

实验二十六　丙型肝炎病毒基因分型检测 / 101

第二节　遗传性疾病的分子生物学检验 / 104

实验二十七　地中海贫血致病基因检测 / 104

实验二十八　进行性假肥大性肌营养不良相关基因检测 / 110

实验二十九　遗传性耳聋相关基因检测 / 113

第三节　肿瘤的分子生物学检验 / 116

实验三十　白血病融合基因BCR-ABL 检测 / 116

实验三十一　人表皮生长因子受体-2 基因检测 / 119

实验三十二　表皮生长因子受体基因（EGFR）突变检测 / 122

第四节　药物代谢及个体识别的分子生物学检验 / 126

实验三十三　华法林代谢酶基因检测 / 126

实验三十四　叶酸代谢酶基因检测 / 129

实验三十五　HLA 基因分型检测 / 132

第四章　临床分子生物学检验创新设计性实验/ 136

实验三十六　乙型肝炎病毒DNA 检测标准品的制备/ 136

实验三十七　荧光定量PCR 高分辨率熔解曲线分析检测基因点突变 / 138

实验三十八　线粒体DNA 的异质性突变检测/ 139

实验三十九　肺癌液体活检 / 140

实验四十　宏基因组测序用于难治性感染的检测 / 142

附录　 临床分子生物学检验技术实验常用缓冲液与试剂的配制/ 144