生物化学实验 原理和方法(第2版)

《生物化学实验原理和方法(第2版)》分上、下篇和附录。上篇为生物化学实验原理，共十四章，对生物分子的分离纯化、含量测定和纯度分析作了较全面扼要的介绍，并着重论述各种层析技术、离心技术、膜分离技术、电泳技术等常用系列化实验方法的基本原理。下篇为生物化学实验，共选编了45个实验，包括糖类、脂类、维生素、蛋白质、酶、核酸等生生物化物质的分离制备与分析鉴定方法，如纸层析、薄层析、离子交换层析、凝胶层析、疏水层析、亲和层析、金属螯合层析、各种电泳和免疫技术，以及紫外-可见吸收光谱测定法等。其中既保留了一些对加强学生基本实验方法和技能训练行之有效的传统实验，也引进了一些较新的生化实验技术。大多数实验可以在6-12学时内完成，有些实验可以组合成一个综合实验，也可以各自独立作为一个实验，便于安排教学。每个实验后附有思考题和参考资料。附录包括各种常用数据表，供读者查阅。
《生物化学实验原理和方法(第2版)》可供综合性大学、师范、医药和农林院校生物化学及相关专业的本科生作为实验课教材，也可供相关教师和科研人员参考。 

上篇 生物化学实验原理
第一章 生物大分子的分离纯化
第一节 概述
第二节 生物原料的选择和预处理
第三节 生物组织与细胞的破碎
第四节 生物大分子的提取
第五节 生物大分子的分离纯化
第六节 生物大分子活性物质的浓缩
第七节 生物大分子的结晶
第八节 生物大分子活性物质的干燥

第二章 生物大分子活性物质含量和纯度的分析方法
第一节 蛋白质含量的测定
第二节 粘多糖的定量及生物活性测定
第三节 核酸含量的测定
第四节 生物大分子纯度的鉴定

第三章 层析技术
第一节 层析技术分类
第二节 液相层析法的基本原理
第三节 柱层析系统基本操作方法

第四章 吸附层析法
第一节 基本原理
第二节 影响吸附的因素
第三节 吸附柱层析法

第五章 纸层析法
第一节 纸层析基本原理
第二节 影响Rf的主要因素
第三节 纸层析实验技术

第六章 薄层层析法
第一节 薄层层析原理
第二节 薄层层析的特点
第三节 吸附剂的性质与选择
第四节 薄层层析实验技术
第五节 薄层层析的定性分析
第六节 薄层层析的定量分析
第七节 薄层层析法的近代发展

第七章 离子交换层析法
第一节 基本原理
第二节 离子交换层析介质
第三节 离子交换树脂
第四节 离子交换纤维素
第五节 葡聚糖凝胶离子交换剂及琼脂糖凝胶离子交换剂
第六节 离子交换层析实验技术
第七节 离子交换层析法的应用

第八章 凝胶层析法
第一节 引言
第二节 基本原理
第三节 凝胶的条件和类型
第四节 凝胶层析实验技术
第五节 影响凝胶层析的主要因素

第九章 亲和层析法
第一节 基本原理
第二节 配基和载体的选择
第三节 亲和吸附剂的制备方法
第四节 亲和层析实验技术
第五节 亲和层析应用举例
第六节 金属螯合亲和层析

第十章 疏水层析法
第一节 疏水层析原理
第二节 疏水层析的分离机理
第三节 影响疏水层析分离的因素

第十一章 电泳技术
第一节 电泳基本原理
第二节 电泳的分类
第三节 醋酸纤维素薄膜电泳
第四节 琼脂糖凝胶电泳
第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第六节 染色方法
第七节 聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中异常现象产生的原因及解决办法
第八节 毛细管电泳

第十二章 离心技术
第一节 离心的基本理论
第二节 离心的基本方法
第三节 离心机的安全操作与保养

第十三章 膜分离技术
第一节 过滤技术
第二节 半透膜分离技术
第三节 超滤技术

第十四章 紫外-可见吸收光谱分析
第一节 光谱分析的基本概念
第二节 化合物中的发色基团及助色基团
第三节 紫外-可见分光光度计
第四节 紫外-可见吸收光谱分析方法
第五节 紫外-可见吸收光谱分析的影响因素

下篇 生物化学实验
实验1 香菇多糖的制备
实验2 魔芋多糖的提取、魔芋葡甘聚糖含量的测定及还原糖成分分析
实验3 甲壳素和壳聚糖的制备及壳聚糖乙酰度的测定
实验4 脂肪碘值的测定
实验5 血清总胆固醇含量的测定(磷硫铁法)
实验6 卵磷脂的制备
实验7 维生素C的定量测定(2，6－二氯酚靛酚滴定法)
实验8 氨基酸定量测定——茚三酮显色法
实验9 氨基酸的分离与鉴定——滤纸层析法
实验10 蛋白质定量测定(1)——微量凯氏定氮法
实验11 蛋白质定量测定(2)——双缩脲法
实验12 蛋白质定量测定(3)——Folin－酚法(Lowry法)
实验13 蛋白质定量测定(4)——考马斯亮蓝染色法
实验14 蛋白质定量测定(5)——BCA法
实验15 蛋白质定量测定(6)——紫外(UV)吸收法
实验16 蛋白质相对分子质量测定(1)——凝胶过滤层析法
实验17 蛋白质相对分子质量测定(2)——SDS_聚丙烯酰胺凝胶电泳法
实验18 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测定蛋白质等电点
实验19 蛋白质及多肽N－末端氨基酸残基测定——DNS－Cl法
实验20 蛋白质印迹法
实验21 血红蛋白脱辅基和重组
实验22 细胞色素c的制备和测定
实验23 凝胶层析法分离纯化含锌金属硫蛋白
实验24 固定化金属离子亲和层析
实验25 疏水层析分离金属结合蛋白
实验26 脂蛋白的分离——琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳法
实验27 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶(活性染色鉴定法)
实验28 谷胱甘肽转硫酶的制备及动力学研究
实验29 溶菌酶的制备及活性测定
实验30 超氧化物歧化酶的分离纯化
实验31 超氧化物歧化酶活性染色鉴定法
实验32 酯酶的分离、纯化与活性测定
实验33 亲和层析及离子交换层析法分离纯化乳酸脱氢酶及其同工酶
实验34 核酸定量测定(1)——定磷法
实验35 核酸定量测定(2)——紫外(UV)吸收法
实验36 猪脾脏DNA制备与二苯胺测定法
实验37 酵母RNA提取与地衣酚测定法
实验38 质粒DNA的微量制备(碱裂解法、煮沸裂解法)
实验39 质粒DNA限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳
实验40 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验41 聚合酶链式反应(PCR)
实验42 核酸原位杂交
实验43 免疫球蛋白的分离纯化
实验44 免疫学检测法
实验45 酶联免疫吸附测定法

附录
附录I 实验室安全及防护知识
一、实验室安全知识
二、实验室灭火法
三、实验室急救
附录Ⅱ 试剂及试剂配制与保存
一、一般化学试剂的分级
二、试剂配制的一般注意事项
三、易变质及需要特殊方法保存的试剂
四、标准溶液的配制和标定
五、缓冲溶液
六、指示剂
七、干燥剂