橘小实蝇嗅觉通讯的分子机制研究

第1章 绪论
1.1 橘小实蝇生物学和生态学特性
1.1.1 橘小实蝇形态特征与生活习性
1.1.2 橘小实蝇生活史
1.1.3 橘小实蝇为害特点
1.1.4 橘小实蝇适生环境与种群动态
1.1.5 橘小实蝇入侵风险评估及适生性分析
1.1.6 橘小实蝇综合控制策略
1.1.7 橘小实蝇化学生态学研究概述
1.2 应用甲基丁香酚防控橘小实蝇的研究进展
1.2.1 甲基丁香酚引诱橘小实蝇雄成虫的生理学基础
1.2.2 甲基丁香酚诱捕橘小实蝇影响因素及田间应用
1.2.3 甲基丁香酚衍生化合物
1.2.4 需解决的科学问题
1.3 研究目的和研究思路
1.3.1 研究目的
1.3.2 研究思路
1.4 研究技术路线
参考文献
第2章 气味结合蛋白在橘小实蝇雄成虫识别甲基丁香酚过程中分子功能的研究
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 供试昆虫
2.2.2 供试试剂与耗材
2.2.3 主要仪器
2.2.4 溶液的配置
2.2.5 试验方法
2.3 结果与分析
2.3.1 人工汰选后对甲基丁香酚无趋性雄成虫比例的变化
2.3.2 对甲基丁香酚有趋性和无趋性雄成虫触角iTRAQ蛋白组鉴定与结果分析
2.3.3 触角差异蛋白GO功能注释与分析
2.3.4 触角差异蛋白KEGG通路分析
2.3.5 qRT-PCR检测差异蛋白编码基因在有、无趋性雄成虫触角的表达量
2.3.6 气味结合蛋白进化树分析
2.3.7 性别与日龄对橘小实蝇成虫对甲基丁香酚趋性及OBPs表达量的影响
2.3.8 甲基丁香酚显著诱导雄成虫触角OBP2表达量上调
2.3.9 OBP2、OBP50c、OB56D-1、OB56D-2生物学功能的研究
2.4 气味结合蛋白OBP2调控橘小实蝇雄成虫趋向ME
参考文献
第3章 气味受体在调控橘小实蝇雄成虫对甲基丁香酚趋性行为的分子功能研究
3.1 引言
3.2 试验方法
3.2.1 供试昆虫
3.2.2 供试试剂
3.2.3 主要仪器
3.2.4 溶液的配置
3.2.5 橘小实蝇雄成虫处理与触角样品收集
3.2.6 触角总RNA提取、cDNA文库构建及Illumina测序
3.2.7 序列De Novo组装和Unigenes功能注释
3.2.8 差异表达基因的筛选与分析
3.2.9 差异表达基因GO功能注释、GO富集与KEGG富集分析
3.2.10 荧光定量PCR（qRT-PCR）验证基因表达量
3.2.11 OR63a-1和OR88a基因序列分析与系统发育树构建
3.2.12 不同日龄和日节律对橘小实蝇雄成虫对ME的趋性及OR63a-1、OR88a表达量的影响
3.2.13 OR63a-1和OR88a在爪蟾卵母细胞表达和双电极电压钳记录
3.2.14 RNA干扰验证OR63a-1和OR88a的生物学功能
3.2.15 数据分析
3.3 试验结果
3.3.1 RNA-Seq数据质控与评估
3.3.2 不同处理组样本转录组测序与De novo组装分析
3.3.3 转录组Unigenes基本功能注释
3.3.4 ME处理组与MO对照组橘小实蝇雄成虫触角差异表达基因分析
3.3.5 差异表达基因的GO分类、GO富集与KEGG通路富集分析
3.3.6 与嗅觉传导相关的差异表达基因鉴定
3.3.7 qRT-PCR检测差异基因的表达量
3.3.8 气味受体进化树分析
3.3.9 日龄和日节律对橘小实蝇雄成虫趋向ME能力及OR63a-1、OR88a表达量的影响
3.3.10 爪蟾卵母细胞系统研究OR63a-1、OR88a分子功能
3.3.11 OR88a调控橘小实蝇雄成虫对ME的趋性行为
3.3.12 橘小实蝇雄成虫识别、转导ME的分子模型
3.4 OR88a调控橘小实蝇雄成虫对ME的趋性行为
参考文献
第4章 结论与讨论、创新点与展望
4.1 结论
4.2 讨论
4.2.1 OBP2参与橘小实蝇雄成虫识别ME的分子过程
4.2.2 OR88a调控橘小实蝇性成熟雄成虫对ME的趋性行为
4.2.3 橘小实蝇性成熟雄成虫识别ME的分子模型
4.3 创新点
4.4 展望
参考文献
附录 嗅觉蛋白质二级质谱图谱