基因工程技术

《基因工程技术》按照基因工程药品生产上游技术岗位的典型工作任务编写，分为四个项目，项目一为实验操作基本技能，主要学习琼脂糖凝胶电泳定性检测目的DNA、紫外分光光度计定量检测目的DNA、大肠杆菌培养基的制备和大肠杆菌的分离与培养四种基因工程实验常用技能；项目二为核酸的分离与纯化，主要学习CTAB法、磁珠法和离心柱法三种常用基因组DNA提取方法，以及碱裂解法对小量质粒DNA和大量质粒DNA的提取纯化方法；项目三为PCR获取目的基因，通过对常规PCR扩增目的基因、重叠PCR合成目的基因、实时荧光定量PCR检测目的基因三个任务的学习和训练，掌握PCR基本原理，熟练基本操作流程；项目四为重组质粒的构建与筛选，通过大肠杆菌感受态的制备，重组质粒的构建与筛选，目的基因的蛋白表达、纯化与功能验证三个任务的学习，掌握目的基因从合成到表达的一般过程，熟练酶切、连接、转化、菌检、蛋白纯化与鉴定的基本操作。本教材设计为活页式新形态教材，以便更灵活选取教学内容；配套有丰富的数字资源，可扫描二维码学习观看；教材有机融入课程思政与职业素养内容，落实立德树人根本任务。本教材不仅可作为职业教育生物技术、生物制药、制药工程等相关专业贯通培养的教材使用，也可作为基因工程药品生产人员、医学生物技术PCR检测人员、核酸检测员的参考书籍。

无

项目一实验操作基本技能001
任务1琼脂糖凝胶电泳定性检测目的DNA002
任务描述002
任务准备002
任务实施003
思政微课堂1我国分子生物学的发展与成就007
扩展学习十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）008
工作任务单011
教师考核012
任务检测013
任务2紫外分光光度计定量检测目的DNA015
任务描述015
任务准备015
任务实施016
思政微课堂2我国在世界上首次人工合成酵母丙氨酸转移核糖核酸022
扩展学习酶标仪检测蛋白活性023
任务检测024
工作任务单025
教师考核026
任务3大肠杆菌培养基的制备027
任务描述027
任务准备027
任务实施028
思政微课堂３安全工作重于泰山030
扩展学习培养基的分类及常用培养基031
工作任务单033
教师考核034
任务检测035
任务4大肠杆菌的分离与培养037
任务描述037
任务准备037
任务实施038
思政微课堂4世界上第一个人工全合成结晶牛胰岛素在中国诞生040
扩展学习微生物无菌操作技术041
工作任务单043
教师考核044
任务检测045
项目二核酸的分离与纯化047
任务1CTAB法提取植物基因组DNA048
任务描述048
任务准备048
任务实施049
思政微课堂5DNA结构的研究历程053
扩展学习SDS法提取细胞DNA054
工作任务单055
教师考核056
任务检测057
任务2磁珠法提取全血基因组DNA059
任务描述059
任务准备059
任务实施060
思政微课堂6生物遗传资源的保护062
扩展学习核酸提取仪063
工作任务单065
教师考核066
任务检测067
任务3离心柱法提取石蜡组织切片基因组DNA069
任务描述069
任务准备069
任务实施070
思政微课堂7保护环境，敬畏自然073
扩展学习石蜡组织切片的常用脱蜡方法074
工作任务单075
教师考核076
任务检测077
任务4碱裂解法小量提取大肠杆菌质粒DNA079
任务描述079
任务准备079
任务实施080
思政微课堂8人类基因组计划083
扩展学习质粒抽提常用方法及试剂盒选择085
工作任务单087
教师考核088
任务检测089
任务5碱裂解法大量提取大肠杆菌质粒DNA091
任务描述091
任务准备091
任务实施092
思政微课堂9让老百姓用得上、用得起更多创新药095
扩展学习细菌内毒素097
工作任务单099
教师考核100
任务检测101
项目三PCR获取目的基因103
任务1常规PCR扩增目的基因104
任务描述104
任务准备104
任务实施105
思政微课堂10PCR之父109
扩展学习三代PCR的发展110
工作任务单111
教师考核112
任务检测113
任务2重叠PCR合成目的基因115
任务描述115
任务准备115
任务实施116
思政微课堂11预防核酸检测“假阳性”118
扩展学习重叠PCR的应用及引物设计注意事项119
工作任务单121
教师考核122
任务检测123
任务3实时荧光定量PCR检测目的基因125
任务描述125
任务准备125
任务实施126
思政微课堂12抗击新冠疫情科技攻关的“中国速度”131
扩展学习数字PCR132
工作任务单133
教师考核134
任务检测135
项目四重组质粒的构建与筛选137
任务1大肠杆菌感受态的制备138
任务描述138
任务准备138
任务实施139
思政微课堂13当好药品质量“守门员”141
扩展学习电转化法制备大肠杆菌感受态细胞142
工作任务单143
教师考核144
任务检测145
任务2重组质粒的构建与筛选147
任务描述147
任务准备147
任务实施148
思政微课堂14用法律守好伦理之门151
扩展学习重组载体构建常见的问题及解决方法153
工作任务单155
教师考核156
任务检测157
任务3目的基因的蛋白表达、纯化与功能验证159
任务描述159
任务准备159
任务实施160
思政微课堂15蓝色血液引来的杀身之祸163
扩展学习重组蛋白表达技术164
工作任务单165
教师考核166
任务检测167
参考文献169