生物医学实验

《生物医学实验》从系统训练学生从事生物科学与医学工程综合实验研究技能的角度，系统编排了50个实验，构成三个模块，即生物分子实验、细胞组织实验和纳米材料实验。生物分子实验以生物技术中的基因上程为主线，系统编排17个实验，教授学生熟悉和掌握三类生物大分子——DNA、RNA和蛋白质的基本制备和检测分析技术。细胞组织实验以细胞为实验核心，编排22个实验，教授学生熟悉和掌握细胞相关的基本实验技术，包括细胞培养、细胞器的分离和各种细胞组分的制备及检测分析技术，同时涵盖组织水平检测细胞组分的实验技术。纳米材料实验以常见的纳米材料为实验现象，编排11个实验，教授学生熟悉和掌握生物医学工程相关纳米材料学科中常见的纳米材料的制备、表征和生物检测应用技术。这些纳米材料包括铁、金、量子点等无机纳米粒子和脂质体、壳聚糖等有机纳米粒子。
《生物医学实验》编写的实验体系，有助于系统培养学生从事牛命科学、纳米材料科学及生物医学工程的实验研究能力。每个实验都按实验口的、实验原理、实验材料、实验步骤、注意事项和示例图片等部分编写，日的是让学生明确每个实验的训练目的，熟悉实验的原理，了解实验所需的各项材料及其功用，掌握成熟细致的实验步骤及实验各环节应注意的事项，以保证实验的质量，同时提供典型实验结果，作为评判实验效果的依据。

前言
第一篇 生物分子实验
实验1 动物组织/细胞总RNA的制备及检测 3
实验2 cDNA的反转录制备 11
实验3 全长基因编码序列或片段的PCR扩增制备及其半定量PCR l4
实验4 GAPDH基因PCR产物的T载休克隆 20
实验5 细菌培养及CaCl2法制备感受态细胞 25
实验6 CaCl2转化法质粒转化 30
实验7 阳性克隆筛选 33
实验8 质粒DNA的碱裂解法分离纯化 43
实验9 T载体克隆的DNA序列分析 49
实验10 质粒DNA的酶切及酶切片段的纯化 56
实验1l GAPDH基因表达载体构建 60
实验12 蛋白表达的SDS-PAGE检测 67
实验13 蛋白表达的Western blot检测 79
实验14 蛋白表达的ELISA测定 91
实验15 蛋白表达的2-DE检测 99
实验16 蛋白原核表达产物的纯化 110
实验17 蛋白原核表达产物的活性分析 115
第二篇 细胞组织实验
实验18 动物细胞培养 121
实验19 细胞凋亡及周期的检测 128
实验20 细胞骨架的观察 138
实验21 细胞染色体标本制备及吉姆萨染色观察 144
实验22 细胞染色体荧光原位杂交 15l
实验23 细胞线粒体及线粒体DNA的制备及检测 159
实验24 细胞基因组DNA的制备 166
实验25 细胞基因组DNA小卫星多态性的Southern blot检测 173
实验26 细胞基因组DNA微卫星多态性的PCR检测 181
实验27 细胞基因组DNA中SNP的DNA微阵列芯片检测 187
实验28 细胞基因组DNA超声剪切及高通量DNA测序文库的制备 197
实验29 细胞中基因表达的定量PCR检测 218
实验30 全基因组基因表达的双色基因芯片分析 233
实验31 全基因组基因表达的单色基因芯片分析 241
实验32 转录组RNA表达的RNA-Seq测定 255
实验33 microRNA表达的miRNA-Seq检测 269
实验34 细胞核蛋白的制备及EMSA分析 283
实验35 细胞中DNA结合蛋白的ChIP-Seq分析 292
实验36 动物组织切片的制备及HE染色 309
实验37 组织中蛋白表达的免疫组化检测 314
实验38 组织巾核酸分子的原位杂交检测 327
实验39 组织中核酸分子的原位PCR检测 334
第三篇 纳米材料实验
实验40 纳米金的制备与表征 345
实验41 纳米金的DNA标记及检测 349
实验42 量子点的制备 357
实验43 荧光量子点的DNA标记及检测 365
实验44 壳聚糖纳米粒制备及荧光标记 370
实验45 壳聚糖纳米粒基因转移实验 375
实验46 脂质体的制备和表征 379
实验47 载药脂质体的制备和表征 382
实验48 磁性纳米材料的制备及表征 387
实验49 磁性纳米材料的细胞氧化应激检测 394
实验50 磁性纳米材料的近红外荧光标记及活体代谢检测 410
附录 告诫 419