医学生物技术实验

本教材率先融汇了中国科学院广州生物医药与健康研究院本科教学中的实验指导内容，旨在培养学生生物化学与分子生物学、干细胞生物学、实验动物学等实验技能。本教材分为三篇：第一篇简要介绍常用仪器设备及基本实验技术、生物学实验室安全与管理；第二篇为基础实验，包括生物化学与分子生物学实验、生物技术实验，对每个实验的实验目的、原理、试剂和器材、实验步骤以及注意事项等详细描述；第三篇为创新实验，包括干细胞生物学概论、发育生物学实验和实验动物学内容。
本教材可供临床医学、生物技术、生物科学等相关学科本科学生使用。

第一篇绪论
第一章常用仪器设备及基本实验技术1
第一节显微镜的结构和使用方法1
第二节离心机的基本原理与使用方法7
第三节分光光度计与酶标仪的原理与使用方法10
第四节核酸电泳与蛋白电泳的原理与使用方法15
第五节聚合酶链反应仪与荧光定量聚合酶链反应仪的原理与使用方法26
第二章生物学实验室安全与管理32
第一节实验室安全概述32
第二节高压灭菌器使用的注意事项33
第三节实验室生物安全防护35
第四节危险化学品使用的注意事项36
第五节培养箱使用的注意事项37
第六节实验动物的安全管理和注意事项38
第二篇基础实验
第三章生物化学与分子生物学实验40
实验一β-半乳糖苷酶活性的测定方法40
实验二BCA法和紫外分光光度法测定蛋白质浓度42
实验三聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测工程菌中绿色荧光蛋白的表达44
实验四蛋白质印迹分析47
实验五RNA的提取与电泳鉴定52
实验六反转录PCR54
实验七肾上腺素、胰岛素对兔血糖浓度的影响57
实验八质粒DNA的提取与鉴定59
第四章生物技术实验62
实验九培养基的配制与灭菌技术62
实验十微生物的培养与保种技术63
实验十一噬菌体的分离及效价测定69
实验十二真核细胞转染71
实验十三单核苷酸多态性实验74
实验十四染色质免疫共沉淀技术75
实验十五发酵法制备发酵乳78
实验十六细胞培养技术79
实验十七细胞的冻存和复苏84
实验十八细胞计数和细胞活力检测85
实验十九CCK-8法检测细胞活性87
实验二十细胞凋亡的形态学观察89
实验二十一流式细胞仪检测细胞凋亡——Annexin V/PI双染色法91
实验二十二ELISA法检测肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）的含量92
实验二十三双转染报告系统的检测94
实验二十四彗星实验检测细胞DNA的损伤96
实验二十五离子交换柱层析法分离氨基酸98
实验二十六免疫荧光染色100
实验二十七免疫组织化学染色101
实验二十八固定化酵母细胞蔗糖酶活性测定103
实验二十九免疫共沉淀技术104
第三篇创新实验
第五章干细胞生物学概论107
实验三十小鼠胚胎干细胞的体外培养107
实验三十一人类胚胎干细胞的衍化生成110
实验三十二健康人体尿液中提取细胞分离、培养实验112
实验三十三诱导多能干细胞实验——小鼠iPS细胞系的建立113
实验三十四碱性磷酸酶染色法检测iPS细胞多能性116
第六章发育生物学实验118
实验三十五斑马鱼胚胎红细胞活体染色118
实验三十六斑马鱼软骨染色观察119
实验三十七斑马鱼囊胚中期转换前后胰岛素蛋白的表达差异120
第七章实验动物学122
实验三十八小鼠学习及记忆检测的行为学实验：水迷宫122
实验三十九小鼠高架十字迷宫行为学检测125
实验四十小鼠强迫游泳行为学测试126
实验四十一小鼠悬尾行为学测试128
实验四十二小鼠糖水偏好行为学测试129
实验四十三利用光遗传学技术调控小鼠搔痒行为实验131
实验四十四小鼠脑部的立体定向手术及药物微量注射133
参考文献138