分子生物学实验原理与技术--聚文网

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内容简介

全书共列三十个分子生物学实验及其相关附录，内容不仅涵盖了基因克隆、基因表达、核酸及蛋白分子杂交等分子生物学常规实验，也包括基因检测、基因打靶、RNA干扰、蛋白分析等新型的分子生物学技术。每个实验包括原理介绍、实验操作、常见问题及注意事项。在介绍原理和流程过程中，穿插一些实用的重点提示、试剂作用及可能出现的现象。本书所列的实验流程均是编者们正在使用的、在教学中进行过实践的、切实可行的方法；所列常见问题及注意事项均是多年科研工作及教学实践的总结积累。

前言
实验一 DNA的提取 1
实验二核酸的定量 8
实验三真核细胞总RNA的提取 11
实验四 PCR扩增目的基因 17
实验五 RT-PCR 25
实验六 DNA琼脂糖凝胶电泳 31
实验七从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 36
实验八目的基因片段与载体的连接 39
实验九用氯化钙法制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞 42
实验十重组DNA的转化 44
实验十 DNA酶切 48
实验十二转化克隆的筛选和鉴定 52
实验十三质粒DNA的分离纯化 55
实验十四含甘油培养物保藏法 65
实验十五 Southern blot分析 67
实验十六 Northern blot分析 74
实验十七实时定量PCR技术 78
实验十八环介导等温扩增技术 87
实验十九 mRNA差异显示技术 93
实验二十外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 97
实验二十一 SDS-PAGE检测蛋白质的表达 100
实验二十二 Western blot检测蛋白质的表达 107
实验二十三双向电泳技术 114
实验二十四 DNA甲基化的检测 138
实验二十五哺乳动物细胞中的RNA干扰技术 141
实验二十六小鼠血浆microRNA提取技术 144
实验二十七 DNA芯片技术检测病原 147
实验二十八 TALEN载体的设计与构建 149
实验二十九 TALEN定点制备及筛选突变体 155
实验三十 CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑技术 157
主要参考文献 163
附录 166

分子生物学实验原理与技术

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