基因工程实验教程

《基因工程实验教程》是以基因工程实验为主要内容，编写的一.本实验教材。全书共包括21个基因工程方面的基本实验,同时也涵盖了与基因工程密切相关的部分细胞培养技术.生物信息学计算机操作技术等内容,书后还附有基因工程常用试剂配制、实验室常用数据和实验室安全的一般常识。书中大部分实验是我们在教学中通过反复摸索后才搬进学生课堂的,也有一部分实验借鉴了已发表的科研论文和互联网的资料以及编写人员自己的相关科研成果。所编写的每个实验都配有基础知识链接和背景资料的介绍,对每个实验的原理和操作步骤以及所出现问题的分析,力求解释详尽，以便于读者能较快地掌握实验原理和操作技巧。本书充分展示了编写人员在编写过程中各自的教学和科研优势，使本教程能够优选限度满足生物技术专业的本科教学需求。

第一部分基因工程实验
第一章组织细胞遗传物质的提取（1）
实验一动物胸腺或脾脏有核细胞基因组DNA提取（1）
实验二哺乳动物组织mRNA提取（3）
实验三植物组织的基因组DNA提取（6）
实验四植物细胞RNA提取（8）
实验五细菌基因组DNA的制备（10）
实验六大肠杆菌质粒DNA的小量提取（12）
第二章核酸凝胶电泳分离与纯化方法（15）
实验七核酸的琼脂糖凝胶电泳（15）
实验八DNA片段的回收与纯化（17）
实验九紫外分光光度法测定核酸含量（19）
实验十PCR反应及其产物检测（21）
第三章DNA的重组连接和克隆的筛选鉴定（27）
实验十一性内切酶切割DNA（27）
实验十二DNA的重组和连接（32）
实验十三大肠杆菌感受态细胞的制备和重组DNA分子的转化（35）
实验十四重组转化子DNA的鉴定（蓝白斑筛选法）（39）
实验十五转化克隆的筛选和鉴定（41）
实验十六工程菌的诱导和酶活性检测（44）
实验十七SDSPAGE电泳（48）
第四章综合大实验（54）
实验十八基因工程综合大实验（54）
实验十九植物基因转化与转基因植株鉴定（57）
第五章基因工程相关的其他实验方法（65）
实验二十性片段长度多态性（RFLP）分析（65）
实验二十一免疫印迹法（Westernblot）检测蛋白表达（67）
第二部分细胞培养技术
第六章细胞培养的一般操作过程（74）
实验二十二实验器械、器皿的清洗、包装和消毒（74）
实验二十三应用微孔滤膜过滤除菌（78）
实验二十四细胞培养用液的配制（80）
实验二十五小鼠肾脏细胞原代培养（82）
实验二十六动物细胞的传代培养（85）
实验二十七烟草叶片愈伤组织诱导和器官发生（86）
实验二十八培养细胞的冻存与复苏（89）
实验二十九细胞计数（91）
实验三十细胞活力的测定方法（93）
实验三十一动物细胞融合（94）
实验三十二MTT法检测细胞相对数和相对活力（97）
实验三十三细胞的基因转染实验—脂质体法（99）
第三部分生物信息学
第七章生物信息学实验（103）
实验三十四生物信息学数据库（103）
实验三十五核酸序列检索（106）
实验三十六原核与真核生物核酸序列分析（109）
实验三十七核酸序列分析和引物设计（120）
实验三十八蛋白质序列分析（130）
第四部分附录
第八章基因工程常用试剂配制及常用数据（141）
附录一基因工程常用试剂配制（141）
附录二PCR引物设计时常用Ⅱ型性内切酶的酶切位点保护碱基（154）
附录三常用的基因工程型宿主菌的相关信息（157）
附录四基因工程常用数据（159）
附录五常用化学试剂的一般常识（167）
附录六分子生物学综合数据库工具箱（176）