生物化学与分子生物学实验指导

为了体观生物化学与分子生物学实验的基础性、综合性和创新性，本书实验安排如下。基础性实验部分主要包括血清蛋白质电泳、酶的活性测定、血糖的测定、血清甘油三酯及总胆固醇的测定等几方面的内容，巩固了学生对生物化学基本理论知识的理解和认识；分子生物学实验部分主要包括核酸的提取、纯化、鉴定，质粒DNA与外源DNA的连接，反转录PCR等，强调综合实验技能；同时本书还介绍了常用实验仪器的使用原理、方法和注意事项。
本书适合作为高等医学院校的本科及研究生适用，也可供医学生物化学及分子生物学教学和科研工作者参考。

前言
实验须知1
实验基本操作4
一、玻璃仪器的洗涤4
二、吸量管的使用5
三、定量吸（移）液器5
四、容量瓶及量筒6
五、离心机及其使用方法6
六、溶液的混匀6
七、保温7
八、过滤7
九、加热7
实验一血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳8
实验二蛋白质的两性性质及等电点测定12
实验三血清蛋白质的盐析及白球比的测定15
实验四双缩脲法测定血清蛋白质的含量20
实验五凯氏定氮法测定蛋白质含量23
实验六RIPA法提取肝总蛋白质27
实验七血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳29
实验八影响酶活性的因素33
一、温度对酶活性的影响33
二、pH对酶活性的影响34
三、激动剂和抑制剂对酶活性的影响35
实验九酶的竞争性抑制作用37
实验十维生素C的定量测定39
实验十一胰岛素、肾上腺素对家兔血糖浓度的影响43
实验十二饱食和饥饿小白鼠肝糖原含量的比较46
实验十三葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度48
实验十四血清中甘油三酯的测定51
一、方法一52
二、方法二53
实验十五血清中总胆固醇的测定55
实验十六酮体的生成和利用57
实验十七过氧化脂质的测定61
实验十八血清中肌酐浓度的测定（除蛋白碱性苦味酸法）63
实验十九核酸的定量测定（紫外吸收法）65
实验二十组织DNA的提取与鉴定68
实验二十一DNA和RNA浓度的检测71
实验二十二大肠杆菌质粒DNA的提取与纯化73
实验二十三肝总RNA的提取与琼脂糖凝胶电泳鉴定78
实验二十四反转录聚合酶链反应检测肝甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA81
实验二十五大肠杆菌的转化及重组子的筛选87
实验二十六外源基因在大肠杆菌中的诱导表达91
实验二十七质粒DNA的性内切酶消化及鉴定94
实验二十八质粒DNA与外源DNA的连接97
实验二十九人血管生长因子基因（hVEGF）的PCR定点突变99
实验三十荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸103
生物化学与分子生物学常用仪器设备介绍107
一、通风橱107
二、恒温摇床108
三、细菌培养箱109
四、PCR仪112
五、台式高速离心机113
六、比色分析法及721-B型分光光度计115
七、微量移液器117
八、数显恒温水浴锅119
九、超净工作台120
十、高压蒸汽灭菌锅121
十一、pH计123
十二、涡旋仪124
分子生物学实验技术无菌操作原则125
分子生物学实验无菌操作技术及注意事项126
一、玻璃器皿的消毒和清洁126
二、无菌器材和液体的准备127
三、无菌操作过程127
四、常用清洁液的配制方法127
实验报告格式与内容128