基因工程实验项目化教程

项目一基因工程实验安全及防护
【学习目标】
【项目说明】
【基础知识】
（一）基因工程概述
（二）基因工程实验安全及生物安全操作规范
【项目实施】
任务1-1基因工程实验常用的有毒化学试剂及其防护
任务1-2掌握基因工程实验常见仪器设备的操作规程和注意事项
任务1-3基因工程实验生物危害废品的处理
【能力拓展】
（一）火灾及预防
（二）触电及急救
【实践练习】
项目二基因工程实验常用溶液及培养基配制
【学习目标】
【项目说明】
【基础知识】
（一）化学试剂的规格和生物试剂的分类
（二）溶液浓度的表示、调整和互换
（三）溶液的配制
（四）生物实验室玻璃器皿的洗涤
【项目实施】
任务2-1移液器的使用与维护
任务2-2配制常用溶液和抗生素
任务2-3常用细菌培养基及配制
【能力拓展】
（一）常用酵母培养基
（二）试剂盒
（三）体外诊断试剂
【实践练习】
项目三大肠杆菌基因组DNA的制备
【学习目标】
【项目说明】
【基础知识】
（一）核酸的理化性质
（二）核酸的分离提取原理
（三）核酸的固相提取方法
【项目实施】
任务3-1制备大肠杆菌基因组DNA的操作准备
任务3-2SDS法制备大肠杆菌基因组DNA
任务3-3CTAB法制备大肠杆菌基因组DNA
任务3-4煮沸法制备大肠杆菌基因组DNA
【能力拓展】
（一）动物基因组DNA的提取
（二）植物基因组DNA的提取
（三）酵母基因组DNA的提取
（四）总RNA和mRNA的提取
【实践练习】
项目四PCR扩增大肠杆菌L-天冬酰胺酶Ⅱ基因（ansB）
【学习目标】
【项目说明】
【基础知识】
（一）目的基因的分离制备
（二）聚合酶链式反应
（三）PCR引物设计
（四）降落PCR
（五）PCR技术的应用
【项目实施】
任务4-1操作准备
任务4-2L-天冬酰胺酶Ⅱ基因（ansB）引物设计
任务4-3PCR扩增L-天冬酰胺酶Ⅱ基因（ansB）
任务4-4降落PCR优化L-天冬酰胺酶Ⅱ基因（ansB）扩增退火温度
【能力拓展】
（一）实时荧光定量PCR
（二）菌落PCR
（三）常用核酸序列数据库
【实践练习】
项目五质粒pET-28a的制备
【学习目标】
【项目说明】
【基础知识】
（一）质粒
（二）pET系列质粒
（三）质粒DNA的提取方法
（四）琼脂糖电泳鉴定质粒DNA
（五）质粒DNA浓度和纯度检测
【项目实施】
任务5-1操作准备
任务5-2SDS碱裂解法小量制备质粒pET-28a
任务5-3SDS碱裂解法大量制备质粒pET-28a
任务5-4少量提取质粒pET-28a的简易方法
任务5-5煮沸裂解法快速提取质粒pET-28a
【能力拓展】
（一）酵母表达载体
（二）质粒图谱的绘制
（三）质粒资源的获取方式
【实践练习】
……