生物化学与分子生物学实验教程 第3版

本实验教程内容包括总论和各论，总论介绍生物化学的基本操作技术，当前生物化学与分子生物学研究常用的电泳、层析、离心技术、印迹技术和聚合酶链式反应等实验技术的原理、种类、应用和前沿；各论共有26个实验，其中蛋白质与核酸、酶学、糖、脂和生物氧化部分的实验是比较成熟的生
物化学基本实验；核酸部分的实验主要是分子生物学常用技术的实验，是近几年在研究生实验课中开设并有部分实验选用到本科生实验教学中的；最后部分有6个综合性实验，在基本技能训练的基础上，对学生进行实验设计和科研入门训练。本书语言简练，实用性强，不仅适合医学院校5年制、7年制及8年制学生使用，也适合相关人员参考。

第1篇总论
实验须知（1）
第1章基本操作技术（3）
第1节玻璃器皿的清洗（3）
第2节吸量管的种类和使用（4）
第3节溶液的混匀、过滤及离心（5）
第4节实验样品的制备（6）
第5节分光光度法（8）
第2章电泳技术（13）
第1节电泳的基本原理（13）
第2节影响电泳的主要因素（13）
第3节区带电泳的分类（14）
第4节几种常见的电泳方法（15）
第5节二维电泳（19）
第3章层析技术（24）
第1节层析技术的分类（24）
第2节层析中的常用术语（24）
第3节纸层析（27）
第4节薄层层析（28）
第5节离子交换层析（28）
第6节凝胶层析（30）
第7节亲和层析（33）
第4章离心分离技术（34）
第1节离心分离技术的原理（34）
第2节离心机的使用方法与维护（35）
第3节离心技术的分类与选择（36）
第4节离心机转子的种类与应用（38）
第5章印迹技术（40）
第1节Southern印迹杂交（40）
第2节Northern印迹杂交（41）
第3节斑点杂交（42）
第4节Western印迹杂交（42）
第6章聚合酶链式反应（44）
第1节PCR技术概述（44）
第2节PCR技术的基本原理（44）
第3节PCR反应条件的优化（46）
第4节PCR技术的扩展（49）
第5节PCR中应注意的问题（52）
第6节PCＲ在医学中的应用（54）
第2篇各论
第7章蛋白质与氨基酸（55）
实验1蛋白质含量的测定（55）
实验2凝胶层析法分离血红蛋白和DNP-鱼精蛋白（或DNP-酪蛋白）（59）
实验3酪蛋白等电点的测定（62）
实验4氨基酸的薄层层析（63）
实验5DNS-氨基酸聚酰胺薄膜双向层析（65）
第8章酶学（68）
实验6影响酶活性的因素（68）
实验7蔗糖酶的专一性（69）
实验8丙氨酸转氨酶活性的测定（72）
实验9乳酸脱氢酶同工酶的分离（74）
实验10转氨基反应（76）
实验11琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制（78）
实验12米氏常数的测定（80）
第9章糖、脂和生物氧化（88）
实验13饥饿和饱食对肝糖原含量的影响（88）
实验14血清甘油三酯测定（89）
实验15高密度脂蛋白中胆固醇含量测定（91）
实验16血清总胆固醇含量测定（93）
实验17乳酸测定（95）
实验18血中葡萄糖含量的测定（99）
第10章核酸（103）
实验19细胞核的分离和纯化（103）
实验20核酸含量的测定（105）
实验21酵母RNA的提取及组分鉴定（108）
实验22真核细胞基因组DNA的制备与定量（110）
实验23Southern印迹杂交（111）
实验24Northern印迹杂交（117）
实验25PCR扩增技术（120）
实验26随机扩增多态性DNA技术（122）
第11章综合性实验（124）
实验27血清γ-球蛋白分离与纯度鉴定（124）
实验28蛋白质的分离、提取、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western印迹（127）
实验29脂蛋白的分离、提纯和电泳鉴定（136）
实验30大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA分子导入原核细胞、提取、纯化鉴定（140）
实验31碱性磷酸酶的纯化及比活性和Km值的测定（146）
实验32血清中鞘糖脂的分离与质谱分析（150）
参考文献（154）
附录一（155）
附录二（169）