医学生物化学与分子生物学实验

本书是“十二五”普通高等教育本科重量规划教材配套教材，全国高等医药院校规划教材。《医学生物化学与分子生物学实验》内容分为四篇，第一篇为生物化学技术基本理论（第一章至第六章）。第二篇为常用医学生物化学实验（第七章），共14个实验，其中9个常用的生化实验及临床生化检验，以及5个生物化学综合性实验，主要是培养学生对生物大分子进行分离分析的综合实验技能，同时也包含了实验动物学、药理学、生理学等相关基本知识和基本技能的综合。第三篇为分子生物学技术基本理论（第八章至第十章）。第四篇为分子生物学实验，即重组DNA表达载体的构建和鉴定（第十一章）。以DNA重组的基本过程为主线，围绕重组DNA技术的各个环节介绍了10个分子生物实验。这些实验都在教学中采用过，并取得了较好的教学效果。
本书可适用于医药、综合性大学有关专业的本科生、长学制学生及研究生的实验课程，也可供其他生物化学与分子生物学实验技术工作者参考。它是一本高等学校生物化学与分子生物学实验教材，也是一本小型生物化学与分子生物学实验技术工具书。

第一篇生物化学技术基本理论
第一章分光光度技术1
第一节分光光度技术的基本原理1
第二节分光光度计的基本结构和使用4
第三节分光光度技术的应用7
第四节分光光度法的误差8
第二章色谱技术10
第一节概述10
第二节常用的色谱方法12
第三章电泳技术20
第一节基本原理20
第二节醋酸纤维薄膜电泳23
第三节琼脂糖凝胶电泳23
第四节聚丙烯酰胺凝胶电泳25
第五节染色方法31
第四章离心技术33
第一节离心技术的基本原理33
第二节离心机的分类35
第三节离心分离的种类36
第四节离心机操作注意事项37
第五章蛋白质组技术38
第一节蛋白质组学38
第二节蛋白质组分离技术38
第三节蛋白质组分析技术40
第六章生物大分子制备技术43
第一节预处理和细胞的分离43
第二节细胞的裂解及细胞器的分离44
第三节生物大分子的提取、分离纯化和定量46
第四节浓缩、干燥及保存52
第二篇常用医学生物化学实验
第七章常用医学生化实验57
实验一血糖的测定57
实验二蛋白质的定量测定59
实验三血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离61
实验四氨基酸的离子交换柱色谱分离62
实验五血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳64
实验六血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳65
实验七过氧化氢酶Km值的测定67
实验八酶的竞争性抑制作用（琥珀酸脱氢酶）69
实验九四氯化碳对小鼠肝脏的损伤71
实验十血清总胆固醇的测定73
实验十一回收试验（尿素氮的回收）74
实验十二血清白蛋白、γ-球蛋白的分离纯化及鉴定76
实验十三碱性磷酸酶的分离纯化79
实验十四双向电泳82
第三篇分子生物学技术基本理论
第八章重组DNA技术86
第一节目的基因的获取87
第二节载体的选择88
第三节分子克隆常用的工具酶88
第四节性内切酶消化DNA及片段回收89
第五节目的基因与载体片段连接91
第六节重组DNA导入宿主细胞92
第七节含重组质粒的宿主菌落的筛选与鉴定93
第九章核酸分子杂交技术95
第一节核酸分子杂交的基本理论95
第二节核酸探针及其标记96
第三节核酸分子杂交的影响因素和种类98
第十章聚合酶链反应（PCR）技术102
第一节PCR基本原理和影响因素102
第二节逆转录PCR技术109
第三节PCR技术进展112
第四篇分子生物学实验
第十一章重组DNA表达载体的构建和鉴定117
实验一质粒DNA的大量制备与纯化117
实验二DNA的纯度、浓度的测定120
实验三目的基因的获取122
实验四DNA的性内切酶消化126
实验五从琼脂糖凝胶中分离回收DNA片段128
实验六DNA片段的连接反应129
实验七用重组质粒DNA转化大肠杆菌130
实验八含重组质粒的细菌菌落的鉴定131
实验九Southern印迹法鉴定132
实验十斑点杂交136
参考文献138