生物化学与分子生物学实验教程 第2版

本书是为了适应医学教育改革、满足培养高素质创新型医学人才的需要而编写的一本生物化学与分子生物学实验教材。本书继承了第1版的基本框架、结构与主要内容，在此基础上增加了一些常用技术，删减了一些很少在本科生或研究生中开展的实验。本书分为两篇：第1篇介绍了生物化学与分子生物学实验基本知识与理论，包括生物化学与分子生物学实验基本知识、生物化学实验基本技术理论、分子生物学实验基本技术理论、生物化学与分子生物学专业常用数据库及其应用；第二篇为生物化学与分子生物学实验操作，共精选了50个生物化学与分子生物学的具体实验。另外，在附录中汇集了常用生物化学与分子生物学试剂的配制方法。本书既可作为医学院校各专业学生（包括研究生）的教学用书，也可作为相关专业教师和科技工作者的教学与科研参考用书。

第一篇 生物化学与分子生物学实验基本知识与理论
第一章 生物化学与分子生物学实验基本知识
一、实验室基本规则
二、实验室基本操作
三、实验样品的制备
四、实验误差与数据处理
五、实验记录与实验报告
第二章 生物化学实验基本技术理论
一、分光光度技术
二、层析技术
三、电泳技术
四、离心技术
第三章 分子生物学实验基本技术理论
一、重组DNA技术
二、核酸分子杂交技术
三、聚合酶链反应技术
四、蛋白质印迹技术
第四章 生物化学与分子生物学专业常用数据库及其应用
一、常用数据库
二、常用分析工具
三、真核基因启动子区生物信息学分析
四、microRNA靶标的预测
第二篇 生物化学与分子生物学实验操作
第五章 生物化学实验操作
实验1 蛋白质的两性反应与等电点测定
实验2 蛋白质的沉淀反应
实验3 蛋白质的热变性
实验4 双缩脲法测定蛋白质含量
实验5 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量
实验6 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量
实验7 紫外吸收法测定蛋白质含量
实验8 BCA法测定蛋白质含量
实验9 凯氏定氮法测定蛋白质含量
实验10 乙酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白
实验11 SDS-PAGE蛋白电泳
实验12 蛋白质双向电泳
实验13 单向上行纸层析分离氨基酸
实验14 转氨基作用与氨基酸的纸层析
实验15 凝胶柱层析分离蛋白质
实验16 动物肝脏DNA的分离提取、鉴定及含量测定
实验17 动物组织RNA的分离提取、鉴定及含量测定
实验18 温度对酶活性的影响
实验19 酸碱度对酶活性的影响
实验20 抑制剂和激活剂对酶活性的影响
实验21 尿淀粉酶活性的测定
实验22 酶反应速度与米氏常数测定
实验23 血糖（葡萄糖）的测定
实验24 血清甘油三酯的测定
实验25 血清胆固醇的测定
实验26 血清高密度脂蛋白胆固醇及其亚组分测定
实验27 血清尿素氮含量测定（改良二乙酰一肟法）
实验28 血液和尿中肌酐含量测定
第六章 分子生物学实验操作
实验29 质粒DNA的提取
实验30 质粒DNA的酶切及电泳
实验31 DNA片段的回收
实验32 DNA片段的连接
实验33 感受态细菌的制备
实验34 重组DNA的转化与筛选
实验35 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达
实验36 常规PCR
实验37 逆转录—聚合酶链反应
实验38 实时定量PCR
实验39 DNA的分子杂交——Southem印迹
实验40 RNA的分子杂交——Northem印迹
实验41 蛋白质的免疫印迹——Western印迹
实验42 cDNA文库的构建
实验43 荧光素酶报告基因检测启动子活性
实验44 电泳迁移阻滞实验
实验45 染色质免疫沉淀实验
实验46 酵母双杂交实验
实验47 RNA干扰实验
实验48 蛋白质免疫共沉淀实验
实验49 RNA免疫共沉淀实验
实验50 GST pull-down实验
附录
附录1 化学试剂分级与注意事项
附录2 常用缓冲液的配制
附录3 硫酸铵饱和度计算表
附录4 常用培养基及抗生素的配制
附录5 离心机转速（r／min）与相对离心力（RCF）的换算