基础生物化学实验原理与方法

上篇原理
第一章绪论2
第二章常用生物材料及其保存技术原理4
第一节生物化学实验常用生物材料4
第二节材料的取样与保存技术原理6
第三章生物分子提取的一般原则7
第一节组织细胞的破碎方法8
第二节生物小分子的提取9
第三节生物大分子的提取11
第四章分离纯化技术和生物化学检测技术16
第一节沉淀技术16
第二节离心技术21
第三节层析技术24
第四节电泳技术33
第五节生物化学检测方法38
第六节生物化学实验中的计算机辅助设计52
下篇方法
第五章蛋白质56
实验一植物组织中氨基酸总量的测定——茚三酮溶液显色法56
实验二氨基酸的纸层析59
实验三谷物种子中赖氨酸含量的测定64
实验四脯氨酸含量的测定66
实验五蛋白质的盐析与透析68
实验六蛋白质含量的测定方法69
实验七蛋白质的两性反应和等电点的测定85
实验八等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点88
实验九对流免疫电泳92
实验十单向定量免疫电泳95
实验十一双向免疫扩散97
实验十二免疫印迹98
第六章酶及维生素103
实验十三酶的高效性及特异性103
实验十四环境条件对酶促反应的影响106
实验十五淀粉酶活性测定109
实验十六脂肪酶活性测定112
实验十七过氧化氢酶活性测定114
实验十八硝酸还原酶活性测定116
实验十九氮蓝四唑法测定超氧化物歧化酶活性120
实验二十米氏常数的测定122
实验二十一苯丙氨酸解氨酶的提取、初步纯化及活性测定126
实验二十二亲和层析纯化胰蛋白酶129
实验二十三植物过氧化物酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳136
实验二十四琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶及乳酸脱氢酶总活性测定143
实验二十五还原型维生素C含量的测定147
实验二十六总维生素C含量的测定150
第七章核酸153
实验二十七CTAB法提取植物总DNA153
实验二十八SDS-苯酚法提取动物总DNA157
实验二十九质粒DNA的制备与纯化160
实验三十酵母RNA的分离及组分鉴定(浓盐法)164
实验三十一核苷酸分析167
实验三十二醋酸纤维素薄膜电泳分离核苷酸170
实验三十三DNA的琼脂糖凝胶电泳173
实验三十四植物总mRNA的提取177
实验三十五PCR技术扩增DNA179
实验三十六Southern印迹181
第八章糖类186
实验三十七还原糖和总糖含量的测定(3，5-二硝基水杨酸比色法)186
实验三十八可溶性糖的硅胶G薄层层析189
实验三十九可溶性糖的测定(蒽酮比色法)192
实验四十谷物淀粉含量的测定(旋光法)194
实验四十一植物组织淀粉和纤维素含量的测定197
第九章脂类200
实验四十二粗脂肪的定量测定200
实验四十三油料种子油脂含量的快速测定(折光仪法)202
实验四十四卵黄中卵磷脂的提取和鉴定205
实验四十五油脂皂化值的测定207
实验四十六油脂碘值的测定208
实验四十七油脂酸值的测定210
第十章DNA克隆与表达212
实验四十八DNA的克隆212
实验四十九蛋白质表达217
实验五十表达产物检测——SDS-PAGE220
第十一章电子生物化学实验224
实验五十一DNA序列下载与格式转换224
实验五十二真核生物基因结构的预测226
实验五十三蛋白质基本性质与功能分析228
实验五十四蛋白质系统发育树的构建232
实验五十五蛋白质相互作用预测235
主要参考文献237
附录一实验室基本知识238
附录二硫酸铵饱和度计算表及相关参数253