基因工程原理(第2版)

本书是作者在多年教学和科研经验的基础上参考大量文献精心编写而成，力求内容新颖，方法优选，脉络清晰，原理分明，术语规范，文图并茂。本书除绪论外，共分9章：基因工程的分子遗传学基础，原核生物分子克隆的宿主和载体系统，基因文库的构建和筛选，基因组DNA的分析，聚合酶链反应与连接酶反应，培养细胞中克隆基因的表达，转基因动植物，人类基因鉴定和基因诊断，基因治疗。在每章后都配有习题，供读者练习，并在书后附有索引，供读者查阅。

第二版前言
第一版前言
绪论
一、基因工程的理论和技术基础及工作程序
二、基因工程技术的建立与发展
三、基因工程的产业化及应用
四、转基因生物的安全性
第一章基因工程的分子遗传学基础
第一节基因和信息流
一、基因的概念
二、遗传的中心法则
三、基因表达的调节——操纵子模型
第二节核酸的生物化学
一、核酸大分子的结构
二、DNA双螺旋的变性与复性
第三节分子杂交
一、原位分子杂交
二、芯片技术
三、印迹杂交
四、异源双链定位法和R环定位法
第四节基因工程中常采用的酶类
一、序列特异的DNA性酶
二、连接酶和激酶
三、DNA聚合酶和RNA聚合酶
第五节研究DNA和RNA的方法
一、核酸的分离纯化
二、电泳
三、DNA测序
四、体外突变
第六节实例1：鉴别特定基因转录物的转录起始点
一、研究目的
二、已知的信息和试剂
三、基本策略
四、注释
五、可供参考的思路
习题
第二章原核生物分子克隆的宿主和载体系统
第一节应用广泛的宿主菌
一、E．coLiK-12的生物学
二、细菌的与修饰系统
三、大肠杆菌的克隆载体
第二节质粒载体
一、质粒生物学
二、质粒上常编码抗生素抗性基因
三、质粒DNA克隆载体
四、通过转化将DNA转移到大肠杆菌中
第三节噬菌体克隆载体
一、λ噬菌体的生物学
一、λ噬菌体克隆载体
三、M13噬菌体克隆载体
第四节基因组DNA克隆载体
一、黏粒载体
二、酵母人工染色体载体
三、细菌人工染色体载体
四、Pl噬菌体载体和Pl人工染色体
五、哺乳动物人工染色体载体
第五节外源DNA和载体连接的方法
一、外源DNA和载体连接方法的分类
二、定向克隆
第六节实例2：拟南芥肌钙网蛋白基因在E．coli中的调节表达
一、研究目的
一、已知的信息和试剂
二、基本策略
四、注释
五、可供参考的思路
习题
第三章基因文库的构建和筛选
第一节基因文库的构建
一、基因组文库和cDNA文库
二、构建基因文库的克隆载体和筛选策略
三、亚克隆
第二节cDNA文库的构建和筛选
一、mRNA的分离纯化
二、cDNA合成
三、cDNA克隆载体
第三节cDNA文库的筛选
一、简并寡核苷酸探针
二、抗体探针
三、差示杂交
四、扣除杂交
第四节cDNA表达文库的功能筛选
一、蛋白质活性分析
二、酵母双杂交系统
三、cDNA噬菌体展示技术
第五节用克隆cDNA作为反应物
一、RNA印迹
二、RNase保护法
三、核连缀（转录）分析
第六节实例3：体外克隆编码细胞内信号蛋白的基因
一、研究目的
二、可利用的信息和资源
三、基本策略
四、注释
五、可供参考的思路
习题
第四章基因组DNA的分析
第一节基因组作图
一、遗传图和细胞学图
二、物理图
三、基因定位
第二节基因组长DNA片段的操作
一、用荧光激活细胞分拣法来分拣染色体
二、标签克隆法
三、用DNA池来筛选基因组文库
第三节基因调节序列作图
一、用体外表达进行基因调节序列作图
二、定位蛋白质结合位点的分析方法
三、电泳迁移率变动分析
第四节实例4：通过定点克隆分离一个人类致病基因
一、研究目的
二、已知的信息和试剂
三、基本策略
四、注释
五、供参考的思路
习题
第五章聚合酶链反应与连接酶反应
第一节基本的PCR方法
一、PCR扩增循环
二、PCR需用的DNA聚合酶
三、PCR引物设计
……
第六章培养细胞中克隆基因的表达
第七章转基因动植物
第八章人类基因鉴定和基因诊断
第九章基因治疗
主要参考文献
索引
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