生物化学与分子生物学实验教程

本教材是为适应高等医学院校基础医学实验教学需要而编写的。一共分为四篇。第一篇是概论，第二篇是常用生物化学与分子生物学实验技术的基本原理与应用介绍，第三篇是关于蛋白质、核酸、酶学、糖脂代谢等的基础生物化学实验，第四篇是基础分子生物学实验，附录主要介绍化学试剂的分级和一些缓冲液的配制方法等。

前言
第一篇 概 论
第一章 实验室基本要求1
第二章生物化学实验基本常识4
第一节实验基本操作4
第二节 实验误差与数据处理10
第三节实验样品的制备15
第二篇常用生物化学与分子生物学实验技术
第三章 光度法的原理与分光光度计的使用18
第四章 层析技术25
第五章 电泳技术33
第六章离心技术39
第七章分子杂交技术和印迹技术44
第八章 PCR技术的原理与应用47
第三篇基础生物化学实验
第九章蛋白质52
实验一蛋白质定量分析（一）：紫外线吸收法52
实验二蛋白质定量分析（二）：二辛可酸法54
实验三蛋白质定量分析（三）：Folin-酚试剂法55
实验四蛋白质定量分析（四）：考马斯亮蓝结合法57
实验五蛋白质定量分析（五）：改良微量凯氏定氮法59
实验六 血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳61
实验七 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE，Tris-甘氨酸缓冲系）分离血清蛋白质63
实验八 血清 γ-球蛋白的提纯67
第十章酶和维生素70
实验九碱性磷酸酶的提取及比活性测定70
实验十 酶促反应动力学实验73
实验十一 金氏法测定血清谷丙转氨酶活性79
实验十二维生素 C的提取与定量： 2, 4-二硝基苯肼法81
第十一章糖84
实验十三 血糖测定（葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法）及肾上腺素对血糖浓度的影响84
实验十四高糖膳食、饥饿和激素对肝糖原含量的影响86
第十二章 脂类89
实验十五 血清总胆固醇测定：硫磷铁法89
实验十六血清甘油三酯测定：异丙醇抽提、乙酰丙酮显色法90
第十三章 核酸93
实验十七核酸浓度测定：紫外线（UV）吸收法93
实验十八核酸浓度测定：定糖法（地衣酚法/二苯胺法）94
实验十九鼠肝 DNA的制备96
实验二十细胞核的分离与核酸的鉴定100
第四篇基础分子生物学实验
第十四章分子克隆技术104
实验二十一大肠杆菌感受态细胞的制备104
实验二十二质粒 DNA的快速提取105
实验二十三质粒 DNA的性核酸内切酶消化酶解107
实验二十四质粒 DNA的琼脂糖凝胶电泳检测108
第十五章 PCR技术111
实验二十五 PCR及产物鉴定111
第十六章 蛋白质免疫印迹技术115
实验二十六蛋白质免疫印迹技术115
参考文献117
附录118
附录一常用洗涤液的种类和用途118
附录二常用蛋白质分子量标准参照物118
附录三常用试剂等级表示法和用途118
附录四常用缓冲液浓度及pH范围119
附录五常用三种凝胶的种类、型号及性能119
附录六硫酸铵饱和度的常用表120
附录七常用酸碱的比重与浓度的关系122
附录八常用缓冲液的配制方法122