生物化学与分子生物学实验 第2版

本教材是为适应高等医学院校基础医学实验教学改革和发展的需要而编写的,本生物化学与分子生物学实验教材。本教材分为基本实验操作及常用仪器使用、经典验证性实验、综合性实验和创新性实验共四篇。在基础理论知识方面，对生物化学与分子生物学的经典研究技术、基本实验操作和常用仪器使用均进行了详细介绍。在实验项目设置上，包括蛋白质定量、层析、电泳、酶学、糖类与脂类、核酸分离纯化、PCR、分子克隆、分子杂交以及RNA干扰、双向电泳、EMSA和ChIP等经典验证性实验、综合性实验和创新性实验。教材内容新颖，体系完整，有所侧重，便于选择。本教材可供医学院校临床医学等各专业五年制、七年制和研究生学生使用，也可供相关专业的科研、教学和技术人员参考。

第一篇基本实验操作及常用仪器使用
第1章生物化学常用研究技术（1）
第2章分子生物学常用研究技术（18）
第3章基本实验操作（23）
第4章常用仪器使用（34）
第5章实验室规则及安全防护（46）
第6章如何撰写实验报告（48）
第二篇经典验证性试验
第1章蛋白质定量实验（49）
实验一双缩脲法测定血清蛋白质含量（50）
实验二Folin-酚试剂法测定蛋白质含量（52）
实验三紫外分光尤皮法测定蛋白质含量（54）
实验四考马斯亮蓝结合法测定蛋白质含量（57）
实验五BCA法测定蛋白质含量（57）
第2章层析实验（61）
实验六纸层析法观察转氨基作用（61）
实验七葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白（63）
实验八离子交换层析分离混合氨基酸（66）
实验九薄层层析分离鉴定氨基酸（68）
第3章电泳实验（72）
实验十血清醋酿纤维薄膜电泳（72）
实验十一聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶（76）
实验十二SDS-PAGE测定蛋白质的分子量（81）
第4章酶学实验（86）
实验十三血清碱性磷酸酶活性测定（86）
实验十四血清丙氨酸氨基转移酶活性测定（89）
实验十五影响且是蛋白酶作用的因素（92）
实验十六丙二酸对琥珀脱氢酶的竞争性抑制作用（95）
实验十七酶的非竞争性抑制作用（98）
实验十八酶米氏常数的测定（100）
第5章糖类与脂类（103）
实验十九血糖浓度的测定（103）
实验二十肾上腺素对血糖浓度的影响（106）
实验二十一血清甘油二醋浓度测定（108）
实验二十二血清总胆固醇浓度测定（112）
实验二十三血清载脂蛋白apoA1的测定（117）
第6章核酸分离纯化技术（120）
实验二十四基因组DNA的提取制备与检测（120）
实验二十五全血基因组DNA的试剂盒法提取制备与检测（124）
实验二十六总RNA的提取制备与检测（124）
实验二十七质粒DNA的提取制备与检测（131）
实睡二十八动物组织核酸的提取及成分鉴定（137）
第7章Pα技术（140）
实验二十九常规PCR技术（140）
实验二十定量PCR技术（144）
第8章分子克隆技术（148）
实验三十一DNA的性酶切与电泳检测（148）
实验三十二凝胶中DNA片断的纯化回收（151）
实验三十二DNA连接实验（153）
实验三十四感受态细胞的制备（157）
实验三十五重组DNA转化与蓝白斑筛选（159）
第9章分子杂交技术（162）
实验三十六Southern印迹杂交（162）
实验三十七Northern印边杂交111111（166）
实验三十八Western印迹（169）
实验二十九核酸原位杂交（172）
附 核酸分子探针的标记（177）
第三篇综合性实验
实验一血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定（180）
实验二碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究（186）
实验三β肌动蛋白基因的克隆（193）
实验四hCS在大肠埃希菌中的表达、纯化与鉴定（200）
实验五hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定（206）
实验六荧光原位杂交实验（210）
实验七双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列（213）
实验八肤或蛋白质N-端氨基酸序列测定（219）
实验九用双荧光素酶报告基因检测启动子活性（228）
实验十电泳迁移阻滞实验（232）
实验十一染色质免疫沉淀（237）
实验十二蛋白质双向电泳（242）
实验十三酵母双杂交实验（247）
实验十四RNA干扰实验（250）
第四篇创新性实验
实验一重要蛋白质或酶的分离纯化（255）
实验二糖尿病的生化及遗传检测分析实验（255）
实验三家族性高胆固醇血症的诊断（256）
实验四血友病的分子诊断（258）
实验五RNA干扰技术靶向沉默目的基因（259）