医学生物化学与分子生物学实验

《医学生物化学与分子生物学实验》是一本简明实用与医学实验教学相适应的实验指导用书，共分为三个部分：第一部分为实验基本操作；第二部分介绍生物化学实验原理与技术，包括分光光度、层析、电泳、离心等技术；第三部分为分子生物学实验原理与技术，以及临床相关的生物化学与分子生物学实验。重点介绍重组DNA的技术路线、分析基因表达的常用方法，如实时定量PCR、蛋白质印迹、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀等内容。《医学生物化学与分子生物学实验》安排了30个实验项目，针对不同专业可选择不同模块实施教学。

生物化学实验须知 1
第一部分 实验基本操作
第一章 玻璃仪器洗涤与清洁 3
第二章 吸量器的选择与使用 5
第三章 溶液的处理 8
第四章 实验样品的制备 9
第五章 实验仪器介绍 11
第六章 实验报告撰写及要求 21
第二部分 生物化学实验原理与技术
第七章 分光光度法 22
概述 22
实验1 紫外分光光度法测定核酸与蛋白质含量 25
实验2 血清蛋白的盐析与定量 27
实验3 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量（Lowry基本法） 28
第八章 层析法 31
概述 31
实验4 纸层析法分析转氨基反应 38
实验5 离子交换柱层析法分离血清蛋白 40
第九章 电泳法 44
概述 44
实验6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离混合蛋白质 49
第十章 离心分离技术 53
概述 53
实验7 单个核细胞的分离——密度梯度离心法分离淋巴细胞 54
第十一章 酶促反应动力学实验56
实验8 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 56
实验9 影响酶活性的因素 59
实验10 碱性磷酸酶米氏常数的测定 61
第三部分 分子生物学实验原理与技术
第十二章 基因工程基本技术 65
概述 65
实验11 大肠杆菌感受态的制备及质粒转化 66
实验12 质粒DNA提取、浓度测定与纯度鉴定 68
实验13 重组质粒DNA的酶切鉴定 70
实验14 聚合酶链反应（PCR）扩增基因 72
实验15 动物组织总RNA的提取 75
实验16 RNA质量检测及cDNA链合成 77
实验17 PCR扩增产物纯化及琼脂糖凝胶电泳回收 79
实验18 DNA性内切酶酶切和酶切产物的回收 81
实验19 目的基因与质粒载体的连接和转化 83
实验20 阳性克隆的筛选与鉴定 85
实验21 外源基因的诱导表达与检测 87
第十三章 基因表达与功能分析的基本方法 90
实验22 实时定量PCR 90
实验23 Westernblot检测目标蛋白的表达 93
实验24 免疫共沉淀（Co-IP）研究蛋白质相互作用 98
实验25 染色质免疫沉淀法（ChIP）研究体内蛋白质与DNA的相互作用 102
第十四章 临床生物化学与临床分子生物学实验 108
实验26 碱性磷酸酶的提取和比活性测定 108
实验27 正常和糖尿病大鼠血糖与血脂的检测及激素对血糖的影响 111
实验28 人颊黏膜上皮细胞基因组DNA的抽提及ACE基因多态性检测 115
实验29 乙醛脱氢酶突变基因型的检测 117
实验30 人血清同型半胱氨酸的测定 119