聚合酶链式反应(PCR)快速检测腐烂苹果中的扩展青霉

本书内容包括：苹果汁中的扩展青霉污染及PCR技术应用、扩展青霉基因组DNA的提取、腐烂苹果中的真菌分离与鉴定、基于氯化苄法提取DNA的PCR检测扩展青霉方法优化、PCR扩增产物的克隆测序、扩展青霉3.3703基因组DNA快速提取、PCR特异性扩增扩展青霉3.3703和扩展青霉3.5425、扩展青霉3.5425实时 PCR快速检测条件优化、PCR快速检测不同来源扩展青霉菌的条件优化。

何鸿举，爱尔兰都柏林大学（University College Dublin）博士，河南科技学院特聘教授、硕士生导师、食品无损检测与分析团队带头人，主要从事食品质量分析与快速检测研究。近五年主持或参与科研项目13项，发表论文30余篇，以靠前作者发表高水平SCI论文10篇，主编教材2部，并担任食品科技领域20余种SCI期刊审稿人。
梁新红，博士，河南科技学院副教授、硕士生导师、食品生物技术教研室主任，河南省青年骨干教师。
何承云，河南科技学院讲师，主要从事食品质量与安全研究。

第一章苹果汁中的扩展青霉污染及PCR技术应用
第一节我国苹果及其加工生产状况
一、苹果特性及其营养价值
二、我国苹果的生产现状与发展前景
三、我国苹果加工面临的竞争与挑战
第二节棒曲霉毒素
一、理化性质与危害
二、分析方法
第三节扩展青霉
一、概述
二、检测方法
第四节PCR技术应用概述
一、PCR技术原理
二、PCR检测技术的发展
三、PCR技术在微生物检测领域的应用
第五节真菌DNA提取
第六节克隆测序
一、感受态细胞的制备
二、蓝白筛选的原理
三、电泳的原理
第七节本研究的目的意义、内容及技术路线
一、研究目的及意义
二、研究内容
三、研究的技术路线
第二章扩展青霉基因组DNA的提取
第一节材料与方法
一、试验菌株与培养基
二、主要试剂
三、主要仪器
四、菌体培养与收集
五、DNA提取方法
六、DNA检测方法
七、PCR扩增方法
八、凝胶电泳检测方法
第二节结果与分析
一、培养方式的选择
二、五种提取扩展青霉基因组DNA方法的比较
三、五种提取方法所提DNA结果的比较
四、电泳检测所提DNA的结果
五、PCR扩增结果
第三节结论与讨论
第三章腐烂苹果中的真菌分离与鉴定
第一节材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节结果与分析
一、棒曲霉素产生菌的主要种类
二、不同产地腐烂苹果中棒曲霉素产生菌的差异
第三节结论与讨论
第四章基于氯化苄法提取DNA的PCR检测扩展青霉方法优化
第一节材料与仪器
一、主要原材料
二、主要试剂
三、主要仪器设备
第二节方法与步骤
一、引物选择
二、退火温度的优化
三、引物浓度的选择
四、模板浓度的选择
第三节结果与分析
一、引物的选择
二、退火温度
三、引物浓度优化结果
四、模板浓度
五、特异性
六、灵敏性检测结果
第四节结论与讨论
第五章PCR扩增产物的克隆测序
第一节材料与仪器
一、主要试剂
二、主要仪器设备
第二节方法与步骤
一、感受态细胞的制备
二、PCR扩增产物回收纯化
三、克隆质粒的构建
四、转化感受态细胞
五、质粒DNA制备
六、质粒的双酶切鉴定
七、测序
第三节结果与分析
一、转化结果
二、阳性克隆鉴定结果
三、测序与Blast结果
第四节结论与讨论
第六章扩展青霉3.3703基因组DNA快速提取
第一节材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
四、提取DNA的纯度及浓度检测
五、PCR扩增
六、凝胶电泳检测
第二节结果与分析
一、四种方法提取DNA纯度及浓度检测结果
二、四种方法提取总DNA样品检测结果
三、PCR扩增检测结果
第三节结论与讨论
第七章PCR特异性扩增扩展青霉3.3703和扩展青霉3.5425
第一节材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节结果与分析
一、PCR扩增引物筛选结果
二、PCR引物特异性试验结果
三、PCR敏感性试验结果
第三节结论与讨论
第八章扩展青霉3.5425实时PCR快速检测条件优化
第一节材料与方法
一、材料与试剂
二、仪器与设备
三、方法与步骤
第二节结果与分析
一、退火温度对扩展青霉3.5425实时PCR结果的影响
二、引物浓度对扩展青霉3.5425实时PCR检测的影响
三、实时PCR灵敏度检验
第三节结论与讨论
第九章PCR快速检测不同来源扩展青霉菌的条件优化
第一节材料与方法
一、材料与试剂
二、主要仪器与设备
三、试验方法与步骤
四、试验真菌培养基
第二节结果与分析
一、PCR退火温度优化结果
二、最适引物浓度的筛选
三、最适模板浓度的筛选
四、最适底物浓度的选择
五、优化参数条件下的PCR检测
六、人工感染六品的PCR检测
第三节结论与讨论
参考文献