医学生物学实验

本书整合细胞生物学、生物化学、分子生物学和医学遗传学4门课程的实验内容，删除验证性实验，精简基础性实验，加强问题（或案例）为引导的综合性实验和探究性实验。本书包括四篇内容，靠前篇为医学生物学技术基本原理，包括显微镜与细胞微观结构、生物大分子制备与分离技术、分光光度技术、放射性同位素技术和人类染色体的识别。同时还包括实验误差与数据处理的内容。第二篇为基础性实验，共14个，重在培养学生的基本操作技能。第三篇为综合性实验，共18个，重在培养学生综合运用不同实验技术解决问题的能力。第四篇为2个探究性实验的例子，作为开展探究性实验的参考，在其后附注了实验设计基本原则。很后的附录部分包括实验须知、实验记录及实验报告的书写、细胞生物学绘图、常用元素原子量表、实验室常用酸碱的比重和浓度等内容。

第一篇医学生物学技术基本原理
第一章显微镜与细胞的微观结构1
第一节普通光学显微镜1
第二节细胞的超微结构9
第二章生物大分子制备与分离技术14
第一节生物大分子的基本制备技术14
第二节层析技术19
第三节电泳技术29
第四节离心技术39
第三章分光光度技术42
第四章放射性同位素技术46
第五章人类染色体的识别52
第六章实验误差与数据处理57
第二篇基础性实验
实验一细胞的基本形态结构62
实验二细胞的显微结构与超微结构67
实验三细胞计数与显微测量72
实验四HEK293细胞的传代培养、冻存与复苏76
实验五大鼠皮质神经细胞的原代培养80
实验六比色法测定蛋白质的含量83
实验七紫外吸收法测定蛋白质含量88
实验八SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定未知蛋白质的分子量90
实验九兔肝基因组DNA的提取与纯化95
实验十PCR技术扩增大鼠Crybb2基因97
实验十一DNA琼脂糖凝胶电泳99
实验十二果蝇唾腺染色体标本的制备与观察101
实验十三人外周血淋巴细胞染色体标本制备104
实验十四人染色体G显带技术及G显带核型分析106
第三篇综合性实验
实验十五兔肝组织细胞核和线粒体的分级分离108
实验十六氧化应激诱导PC12细胞凋亡111
实验十七血清蛋白的分离纯化与鉴定114
实验十八兔肝碱性磷酸酶的提取纯化与比活性测定118
实验十九碱性磷酸酶米氏常数的测定125
实验二十激素对血糖水平的调节作用128
实验二十一烟酸衍生物对血脂的影响132
实验二十二四氯化碳致急性肝损伤的组织学与肝功能检测137
实验二十三质粒的碱裂解法制备及电泳检测141
实验二十四大鼠β-晶体蛋白B2在大肠埃希菌中的诱导表达145
实验二十五SouthernBlot技术检测人胶质瘤细胞EGFR基因的扩增147
实验二十六NorthernBlot技术检测大鼠HIF-1αmRNA表达152
实验二十七Myc-PSD-95-PDZ1融合蛋白在HEK293细胞中的表达155
实验二十八利用定点突变技术构建活化型n-Src的重组质粒159
实验二十九环磷酰胺对小鼠骨髓嗜多染红细胞的毒性作用164
实验三十人乳腺癌组织中ERBB2基因扩增的检测166
实验三十一人基因性别的鉴定169
实验三十二大鼠骨髓间充质干细胞成脂成骨的定向诱导分化172
第四篇探究性实验
例1脑缺血再灌注格尔德霉素神经保护作用的机制研究175
例2EZH2对大鼠骨髓间充质干细胞成脂成骨分化的影响177
附录181