生物化学与分子生物学实验教程--聚文网

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《普通高等教育"十一五"重量规划教材配套教材:生物化学与分子生物学实验教程(第3版)》语言简练，实用性强。不仅适合医学院校5年制、7年制及8年制学生使用，也适合相关人员参考。

内容简介

生物化学及分子生物学是一门实践性极强的学科，纵观学科发展历史，糖、脂肪、蛋白质与核酸研究的发展，均是在实验研究基础上建立，近代分子生物学的奠基石之一的双螺旋结构学说更是在众多实验成果以及Watson和Crick研究总结的基础上提出的，很难设想没有实验研究，生化及分子生物学会发展成今天的生物医学学科的领头羊地位。本教材中首先打破实验教学依附于理论教学的传统模式，重新确定实验教学的地位。打破传统的以验证性实验为主的框架，建立新的实验比例，即综合性、设计性比例为主，使学生在掌握基本实验技术的基础上，动手操作一些综合性的大实验，提高学生综合分析能力及实验动手能力。

第1篇总论
实验须知
第1章基本操作技术
第1节玻璃器皿的清洗
第2节吸量管的种类和使用
第3节溶液的混匀、过滤及离心
第4节实验样品的制备
第5节分光光度法
第2章电泳技术
第1节电泳的基本原理
第2节影响电泳的主要因素
第3节区带电泳的分类
第4节几种常见的电泳方法
第5节二维电泳
第3章层析技术
第1节层析技术的分类
第2节层析中的常用术语
第3节纸层析
第4节薄层层析
第5节离子交换层析
第6节凝胶层析
第7节亲和层析
第4章离心分离技术
第1节离心分离技术的原理
第2节离心机的使用方法与维护
第3节离心技术的分类与选择
第4节离心机转子的种类与应用
第5章印迹技术
第1节Southern印迹杂交
第2节Northern印迹杂交
第3节斑点杂交
第4节Western印迹杂交
第6章聚合酶链式反应
第1节PCR技术概述
第2节PCR技术的基本原理
第3节PCR反应条件的优化
第4节PCR技术的扩展
第5节PCR中应注意的问题
第6节PCR在医学中的应用
第2篇各论
第7章蛋白质与氨基酸
实验1蛋白质含量的测定
实验2凝胶层析法分离血红蛋白和
DNP—鱼精蛋白（或DNP—酪蛋白）
实验3酪蛋白等电点的测定
实验4氨基酸的薄层层析
实验5 DNS.氨基酸聚酰胺薄膜双向层析
第8章酶学
实验6影响酶活性的因素
实验7蔗糖酶的专性
实验8丙氨酸转氨酶活性的测定
……
第9章糖、脂和生物氧化
第10章核酸
第11章综合性实验
参考文献
附录一
附录二

摘要

    （二）分子筛效应
    由于在凝胶电泳中，凝胶浓度不同，其网的孔径大小也不同，可通过的蛋白质分子量范围也就不同。在分离胶中孔径较小，分子量和构型不同的蛋白质分子，通过一定孔径的凝胶时所受阻力不同，从而引起泳动速度的变化，所以多种蛋白质即使所带电荷相同，迁移率相等，在聚丙烯酰胺中经一定时间泳动后，也能彼此分开。大分子受阻程度大。走在后面，小分子受阻小，走在前面。
    （三）电荷效应
    由于各种蛋白质所带电荷不同，有效迁移率也不同，它们在浓缩胶和分离胶交界处被浓缩成狭窄区带，仍以一定顺序排列成各自的小圆盘状，紧接在一起。当它们进入分离胶时，由于电泳体系已处于一个均一连续状态中，故此时以电荷效应为主，带不同电荷的蛋白质离子按其移动速度大小顺次分离。
    二、SDS.聚丙烯酰胺凝胶电泳
    聚丙烯酰胺凝胶电泳是根据蛋白质分子（或其他生物大分子）所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率而分离成若干条区带。然而有时两个分子量不同的蛋白质，由于其分子大小的差异，被他们所带电荷的差别补偿而以相同的速度向阳极移动，因而不能达到分离的目的。SDS.聚丙烯酰胺凝胶电泳就是设法将电荷差异这一因素除去或减少到可以不计的程度。

生物化学与分子生物学实验教程

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