市政与环境工程生物技术

前言
第一章 糖类的制备与测定 1
实验一 糖类的性质实验（一）：糖类的颜色反应 2
实验二 糖类的性质实验（二）：糖类的还原作用及多糖的试验 4
实验三 杜氏（Tollen）实验鉴定戊糖 5
实验四 总糖的测定：蒽酮比色法 6
实验五 总糖和还原糖含量的测定 8
实验六 可溶性糖的提取和薄层层析分离 10
实验七 糖的旋光性和变旋现象 13
实验八 甲壳素和壳聚糖的制备及测定 15
第二章 脂类测定技术 18
实验九 粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 19
实验十 碘价的测定（Hanes法） 21
实验十一 皂化价的测定 23
实验十二 油脂酸价的测定 24
实验十三 脂肪酸价的测定 26
第三章 蛋白质分析、测定技术 28
实验十四 蛋白质的性质实验（一）：蛋白质等电点的测定 29
实验十五 蛋白质的性质实验（二）：蛋白质的沉淀及变性 31
实验十六 蛋白质的透析 34
实验十七 蛋白质定量分析（一）：紫外分光光度法 35
实验十八 蛋白质定量分析（二）：酚试剂法 37
实验十九 蛋白质定量分析（三）：双缩脲法 39
实验二十 蛋白质定量分析（四）：考马斯亮蓝G-250染色法 41
实验二十一 蛋白质定量分析（五）：微量凯氏定氮法 43
实验二十二 蛋白质定量测定（六）——BCA法 47
实验二十三 乳中酪蛋白的分离 49
实验二十四 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子量 51
实验二十五 凝胶层析法分离纯化蛋白质 54
实验二十六 甲醛滴定法测定氨基酸 56
实验二十七 DNS-氨基酸的制备和鉴定 58
实验二十八 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N-端氨基酸 60
实验二十九 氨基酸纸层析法 63
实验三十 氨基酸的薄层层析分离和鉴定 66
实验三十一 氨基酸定量测定——茚三酮显色法 69
实验三十二 离手交换柱层析法分离氨基酸 71
实验三十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子量 74
第四章 核酸相关测定、提取技术 77
实验三十四 核酸的定量测定（一）：定磷法 78
实验三十五 核酸的定量测定（二）：紫外吸收法 80
实验三十六 酵母RNA的提取 82
实验三十七 RNA的定量测定：苔黑酚法 84
实验三十八 动物肝脏中DNA的提取 86
实验三十九 植物DNA的提取与测定 88
实验四十 腺苷三磷酸的定量测定：纸电泳法 91
实验四十一 质粒DNA的提取 92
实验四十二 DNA琼脂糖凝胶电泳 94
第五章 酶的实验及相关技术 97
实验四十三 过氧化氢酶和过氧化物酶的作用 98
实验四十四 乳酸脱氢酶及其辅酶Ⅰ的作用 100
实验四十五 温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活力的影响 101
实验四十六 酵母醇脱氢酶的提纯 104
实验四十七 过氧化氢酶米氏常数的测定 107
实验四十八 用正交法测定几种因素对酶活力的影响 110
实验四十九 溶菌酶的提纯结晶和活力测定 114
实验五十 淀粉酶的分离与纯化 116
实验五十一 碱性磷酸酶的提取和分离及比活力测定 118
实验五十二 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶 121
实验五十三 植物过氧化酶活性的测定 125
实验五十四 超氧化物歧化酶SOD的分离纯化技术 126
实验五十五 超氧化物歧化酶活性测定 128
实验五十六 生化需氧量（BOD5）的测定 130
第六章 环境专业常用分子生物技术 134
实验五十七 凝胶的制备及电泳技术 135
实验五十八 普通PCR及产物纯化 137
实验五十九 实时荧光定量PCR技术 139
实验六十 RNA的逆转录及其PCR技术 140
实验六十一 质粒的性内切酶消化及其与目标基因的体外重组质粒DNA酶切（质粒性内切酶消化酶切） 146
实验六十二 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 149
实验六十三 重组DNA的蓝白斑筛选 152
实验六十四 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 154
实验六十五 cDNA文库的构建 158
实验六十六 Southern杂交 164
实验六十七 Northern杂交 169
实验六十八 Western杂交 171
参考文献 173