外源CpTI基因在转基因苹果中的表达及特性

本书以转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因（CpTI）苹果（Malus domestica Borkh.）为试验材料（包括嘎拉、王林、乔纳金和富士60个株系），应用PCR、RT-PCR、荧光原位杂交、室内虫试等方法，研究了外源CpTI基因在苹果转化组培苗中DNA、RNA和蛋白等水平的表达；应用转基因花粉培养、果实蛋白毛细管区带电泳等方法，研究了转基因苹果花粉和果实的特性；通过杂交授粉试验，研究了外源基因在转基因苹果中的遗传规律；通过试管微嫁接方法，研究了标记基因在苹果砧穗间的传导性。

前言
第一章 引言
1 苹果遗传转化研究
1.1 苹果遗传转化研究主要进展
1.2 影响苹果遗传转化效率的因素
2 外源基因在转基因植物中的表达
2.1 转化方法对外源基因表达的影响
2.2 拷贝数对外源基因表达的影响
2.3 外源基因和内源基因的同源性对基因表达的影响
2.4 启动子对外源基因表达的影响
2.5 环境因子对外源基因表达的影响
3 转基因安全性评价
3.1 转基因植物的食用安全性
3.2 转基因植物的生态环境安全性
4 研究背景、内容和目的
第二章 外源CpTI基因在苹果转化株系中的表达研究
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
2 结果与分析
2.1 外源基因在常规离体继代培养植株中的稳定性
2.2 外源CpTI基因在田间转基因苹果中的稳定性研究
2.3 外源CpTI基因在苹果细胞核上的杂交
2.4 转基因植株抗虫株系的筛选
2.5 外源CpTI基因在转化株系mRNA水平表达
2.6 毛细管区带电泳对转化株系蛋白质表达检测
3 讨论
3.1 外源基因在转化株系中的稳定性
3.2 植物荧光原位杂交技术探讨
3.3 外源基因在不同转化株系中的表达
3.4 外源基因在不同水平表达的相关性
4 小结
第三章 苹果转基因株系特性研究
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验内容及方法
2 结果与分析
2.1 花粉萌发率、花粉量和生活力
2.2 转基因苹果花粉对Kan抗性研究
2.3 外源基因对花器官不同开放阶段内源激素的影响
2.4 转基因苹果花粉形态观察
2.5 转基因苹果花粉萌发动态观察
2.6 转基因苹果花药和花粉发育的显微观察
2.7 转基因嘎拉果实特性研究
2.8 转基因嘎拉果实nptII酶活性测定
2.9 果实蛋白毛细管区带电泳
2.10 外源CpTI基因在转化株系F1代中的表现
3 讨论
3.1 转基因苹果花粉特性
3.2 关于转基因苹果果实安全性的探讨
3.3 外源基因在苹果转化株系F1代中的表现
3.4 外源基因对果实品质的影响
4 结论
第四章 外源基因在砧穗间传导特性研究
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
2 结果与分析
2.1 组培苗质量对苹果微嫁接成活率的影响
2.2 不同植物生长调节剂对苹果微嫁接成活率的影响
2.3 接穗叶片数对苹果微嫁接成活率的影响
2.4 不同品种对苹果微嫁接成活率的影响
2.5 外源基因对苹果微嫁接亲和力的影响
2.6 转基因砧木外源nptⅡ基因对接穗卡那霉素抗性的影响
2.7 转基因接穗外源nptⅡ基因对砧木卡那霉素抗性的影响
3 讨论
3.1 影响苹果试管微嫁接成活率的因素
3.2 nptⅡ标记基因在苹果砧木基因转化中的利用
4 结论
参考文献
附录