动物细胞培养技术

1.以动物细胞培养工作流程为导向，培养学生综合实验能力；2.以实践性、应用性为特色，将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体，充分体现技能培养的特色；3.读者覆盖面广，可作为生物技术、生物制药、动物医学、动物科学以及医学类本科生、专科生的实验参考教材，也可作为组织与细胞培养相关领域研究人员的指导资料。

本书详细介绍了动物细胞培养技术中培养液与培养基、培养设备设施、原代细胞培养技术、细胞建系和传代培养技术、动物细胞的冻存和复苏及污染检测、细胞融合与单克隆抗体技术等内容。本书以动物细胞培养工作流程为导向，以学生综合能力培养为本位，以实践性、应用性为特色，将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体，充分体现技能培养的特色。 本书可作为生物技术、生物制药、动物医学、动物科学以及医学类本科生、专科生实验时的参考教材，同时也可作为组织与细胞培养相关领域研究人员的指导资料。

第一章 绪论
第一节 动物细胞培养发展简史
第二节 细胞培养的特点与应用
一、细胞培养的特点
二、细胞培养技术的应用研究
第三节 细胞培养生物学
一、体外培养细胞与体内细胞的差异与分化
二、体外培养细胞的类型
三、体外培养细胞的生长与增殖过程
四、细胞周期
第四节 细胞培养条件与影响因素
一、无菌环境
二、细胞分离方法
三、细胞培养温度
四、细胞培养基的成分
五、接种密度
六、培养基的pH值
七、细胞的冻存与复苏
八、附着底物
九、细胞供体年龄
第二章 培养用液与培养基
第一节 培养基的基本性质
一、营养成分
二、pH值
三、渗透压
四、缓冲能力
五、促生长因子及激素
六、无毒、无污染
第二节 水和平衡盐溶液
一、水
二、平衡盐溶液
第三节 天然培养基
一、血清
二、血浆
三、鸡胚浸出液
四、水解乳蛋白
五、胶原
第四节 合成培养基
一、基本组分
二、常用细胞培养基
第五节 细胞培养其它常用液
一、平衡盐溶液（Balanced salt solution，BSS）
二、消化液
三、pH调整液
四、抗生素
五、谷氨酰胺补充液
六、二肽谷氨酰胺（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）
第三章 培养用设施与设备处理
第一节 细胞培养实验室
一、无菌操作区
二、孵育区
三、制备区
四、储藏区
五、清洗和消毒灭菌区
第二节 细胞培养用仪器及设备
一、CO2培养箱
二、超净工作台/生物安全柜
三、纯水系统
四、细胞冷冻储存器
五、冰箱
六、恒温水浴
七、离心机
八、显微镜
九、高压蒸汽灭菌器
十、电热烘干箱
十一、特殊设备
第三节 细胞培养用器械及器皿
第四节 培养用品的处理
一、培养用品的清洗
二、包装
三、消毒灭菌
四、消毒方法的选择
第四章 原代细胞培养技术
第一节 原代培养基本知识
一、原代细胞的分离方法
二、原代细胞的纯化方法
三、原代细胞培养
四、原代细胞的生物学鉴定
五、注意事项
第二节 上皮组织细胞的培养
一、试剂与器材
二、原代细胞的分离和纯化
三、肠上皮细胞的鉴定
四、注意事项
第三节 结缔组织细胞的培养
一、疏松结缔组织
二、致密结缔组织
三、脂肪组织
四、网状组织
五、鸡成纤维细胞的原代培养
第四节 肌组织细胞的培养
一、骨骼肌
二、平滑肌
三、心肌
四、骨骼肌卫星细胞的培养
第五节 神经组织细胞的培养
一、神经细胞的原代培养
二、神经细胞组织的培养
三、神经细胞原代培养的意义
第六节 干细胞的培养
一、干细胞的分类
二、胚胎干细胞的培养
三、成体干细胞的培养
第五章 细胞建系、传代培养技术
第一节 正常细胞系的建立和鉴定
一、细胞系的建立
二、细胞系的鉴定
第二节 癌细胞系的建立和鉴定
一、细胞系的建立
二、细胞系的鉴定
第三节 传代培养基本知识
一、传代培养的过程
二、Vero细胞的培养
三、HeLa细胞的培养
第四节 传代细胞的大规模培养
一、悬浮规模培养
二、单层规模培养
三、动物细胞大规模培养的方法
四、动物大规模培养技术的应用
五、动物细胞生物反应器
六、大规模培养技术的操作方式
第六章 动物细胞的冻存、复苏及污染检测
第一节 动物细胞冻存
一、冻存的必要性
二、冷冻保存的原理
三、影响冻存细胞活性的因素
四、细胞冻存方法
第二节 动物细胞复苏
一、细胞复苏的原理
二、细胞复苏的方法
三、细胞复苏的要点
第三节 细胞培养污染检测
一、可见微生物污染检测
二、支原体检测
三、病毒污染检测
第七章 细胞融合与单克隆抗体技术
第一节 单克隆抗体的概念
第二节 杂交瘤技术的诞生
第三节 单克隆抗体的制备
一、动物免疫
二、细胞融合
三、杂交瘤细胞筛选
四、杂交瘤细胞的克隆化
五、杂交瘤细胞的冻存与复苏
六、单抗特性的鉴定
第四节 单克隆抗体的生产
一、动物体内生产单抗的方法
二、体外培养生产单抗的方法
三、杂交瘤细胞的无血清培养
第五节 单克隆抗体的纯化
一、腹水型单抗的纯化
二、单抗的粗提
第六节 单克隆抗体的标记
一、酶标记
二、荧光素标记
三、同位素标记
四、生物素标记
五、其它标记技术
附录
一、常用的动物细胞系
二、细胞培养常用术语
三、细胞培养常用缩写词
四、常用培养基成分和配方
五、细胞计数（台盼蓝细胞染色计数）