生物分离与纯化技术（第三版）

　　生物分离与纯化技术（第三版）依据教育部《职业院校教材管理办法》等文件要求，结合生物技术企业职业岗位的特点，重点阐述生物分离过程中各典型单元操作的基本原理、重要设备和基本操作技术，将工匠精神有效地渗透到各个操作技术中。通过学习，学生的专业能力与职业素养得以养成。 　　全书分为三大模块。模块一是分离与纯化单元操作技术，包括预处理及固液分离技术、细胞破碎技术、萃取技术、固相析出分离技术、色谱分离技术、膜分离技术、电泳技术、浓缩与干燥技术。模块二介绍单元操作技术实训，包括22个单元操作技术实训。模块三介绍单元集成技术实训，包括16个综合实训。每一单元都配有同步训练，供学生课后练习巩固。 　　本书可供高职高专院校生物及相关专业的师生使用，也可作为相关行业技术人员的培训资料。

陈芬，女，1966.5生，湖北崇阳人，中共党员，基本简历如下：1985.9-1989.6华中师范大学化学系学习（本科，学士）1989.6-2006.1湖北职业技术学校任教2000.9-2003.6华中科技大学学习（硕士）2006.1～至今武汉职业技术学院任教在工作期间，本人1、积极参加专业建设和课程建设，参与了多项专业建设项目。 2、积极参与课程改革，主编及参编了多本实用教材。3、主持了两个省级技术课题。4、担任《生物化学与技术》《工业发酵分析》《酶制剂制造工》、《生物分离与纯化技术》等课程的主讲教师。5.撰写了多篇教研与技术论文。

模块一　分离与纯化单元操作技术 第一单元　绪论/2 1.1生物分离与纯化技术概述/2 1.2生物分离与纯化技术的基本知识/4 1.3生物分离与纯化技术的发展历史和发展趋势/6 1.3.1生物分离与纯化技术的发展历史/6 1.3.2生物分离与纯化技术的发展趋势/6 同步训练/7 第二单元　预处理及固液分离技术/9 2.1预处理技术/9 2.1.1发酵液过滤特性的改变/10 2.1.2发酵液的相对纯化/12 2.2固液分离技术/14 2.2.1过滤技术/14 2.2.2离心技术/16 2.3典型案例/20 同步训练/22 第三单元　细胞破碎技术/23 3.1细胞壁的组成与结构/24 3.1.1微生物细胞壁的化学组成和结构/24 3.2常用的细胞破碎方法/26 3.2.1机械法/26 3.2.2非机械法/29 3.3细胞破碎效果评价与方法选择/31 3.3.1细胞破碎效果的评价/31 3.3.2各种细胞破碎方法的选择依据/32 3.4基因工程包含体的纯化方法/33 3.4.1包含体的形成/34 3.4.2包含体的纯化方法/34 3.5细胞破碎技术的发展方向/35 3.6典型案例/36 同步训练/37 第四单元　萃取技术/39 4.1概述/39 4.1.1萃取的概念/39 4.1.2萃取的分类/40 4.1.3萃取的特点/40 4.2溶剂萃取技术/41 4.2.1溶剂萃取原理/41 4.2.2溶剂萃取流程/42 4.2.3溶剂萃取影响因素/43 4.2.4萃取剂的选择/44 4.3固液浸取技术/44 4.3.1固液浸取的概念/44 4.3.2固液浸取的原理/44 4.3.3固液浸取过程的影响因素/45 4.3.4固液浸取的方法/46 4.4双水相萃取技术/46 4.4.1双水相萃取的原理和特点/46 4.4.2双水相萃取工艺流程/48 4.4.3影响双水相萃取的因素/49 4.4.4双水相萃取的应用/50 4.5超临界流体萃取技术/50 4.5.1超临界流体萃取的原理/51 4.5.2超临界流体萃取的工艺流程/52 4.5.3超临界流体萃取技术的应用/53 4.6反胶团萃取技术/55 4.6.1反胶团及其形成/55 4.6.2反胶团萃取原理/55 4.6.3影响反胶团萃取的因素/56 4.6.4反胶团萃取流程/57 4.6.5反胶团萃取蛋白质的应用/57 4.7典型案例/57 同步训练/61 第五单元　　固相析出分离技术/62 5.1盐析法/63 5.1.1盐析法的基本原理/63 5.1.2盐析用盐的种类/64 5.1.3盐析操作方法/66 5.1.4盐析注意事项/69 5.1.5影响盐析效果的因素/69 5.2有机溶剂沉淀法/70 5.2.1有机溶剂沉淀法的基本原理/71 5.2.2有机溶剂的选择/71 5.2.3有机溶剂沉淀的操作方法/74 5.2.4影响有机溶剂沉淀效果的因素/74 5.3其他沉淀法/76 5.3.1等电点沉淀法/76 5.3.2水溶性非离子型聚合物沉淀法/77 5.3.3成盐沉淀法/78 5.4结晶技术/79 5.4.1晶体的概念/79 5.4.2结晶的过程/79 5.4.3影响结晶析出的主要条件/83 5.5典型案例/84 同步训练/87 第六单元　色谱分离技术/90 6.1吸附色谱/93 6.1.1基本原理/93 6.1.2吸附色谱技术分类/93 6.1.3影响吸附分离的因素/93 6.1.4吸附剂、展层剂及洗脱剂/94 6.1.5柱吸附色谱分离基本操作/95 6.1.6吸附色谱的应用/96 6.2分配色谱/97 6.2.1基本原理/97 6.2.2载体的选择/97 6.2.3固定相与流动相的选择/97 6.2.4分配色谱的应用/98 6.3离子交换色谱/98 6.3.1基本原理/98 6.3.2离子交换介质/99 6.3.3离子交换色谱流动相的选择/105 6.3.4离子交换色谱的应用/107 6.4凝胶过滤色谱/108 6.4.1基本原理/108 6.4.2凝胶过滤色谱介质/109 6.4.3凝胶过滤色谱操作方法/112 6.4.4凝胶过滤色谱的应用/114 6.5亲和色谱/115 6.5.1基本原理/115 6.5.2亲和色谱的操作/118 6.5.3几种重要的亲和色谱/119 6.5.4亲和色谱的应用/119 6.6疏水色谱/121 6.6.1基本原理/121 6.6.2疏水色谱的应用/122 6.7高效液相色谱/123 6.7.1基本原理/123 6.7.2高效液相色谱设备配置和操作方法/125 6.7.3高效液相色谱法的应用 /126 6.8典型案例/127 同步训练/129 第七单元　膜分离技术/132 7.1膜分离过程的分类和特点/132 7.1.1膜分离过程的分类/133 7.1.2膜分离过程的特点/136 7.2膜材料与膜组件/136 7.2.1膜材料/136 7.2.2膜组件/137 7.3影响膜过滤分离效果的因素/141 7.4膜污染及其控制措施/142 7.5常见的几种膜分离技术/144 7.5.1微滤/144 7.5.2超滤/147 7.5.3纳滤/149 7.5.4反渗透/150 7.5.5电渗析/152 7.5.6其他膜分离技术/153 7.6典型案例/154 同步训练/157 第八单元　　电泳技术/159 8.1电泳技术概述/159 8.1.1电泳技术发展史/160 8.1.2电泳基本原理/160 8.1.3电泳的分类/163 8.1.4电泳装置的基本结构/164 8.2几种典型的电泳技术/165 8.2.1乙酸纤维素薄膜电泳/165 8.2.2琼脂糖凝胶电泳/167 8.2.3聚丙烯酰胺凝胶电泳/169 8.2.4双向凝胶电泳/173 8.2.5等电聚焦电泳/174 8.3典型案例/175 同步训练/177 第九单元　浓缩与干燥技术/179 9.1浓缩技术/180 9.1.1蒸发/180 9.1.2冷冻浓缩/181 9.1.3其他浓缩方法简介/182 9.2干燥技术/183 9.2.1干燥基本原理/183 9.2.2常见的干燥方法/183 9.3典型案例/185 同步训练/187 模块二　单元操作技术实训 实训1大肠杆菌的破碎及破碎率的测定/191 实训2啤酒酵母的培养及菌体的离心分离/193 实训3青霉素的萃取与萃取率的计算/195 实训4双水相萃取相图的制作/196 实训5双水相萃取分离酿酒酵母中的延胡索酸酶/198 实训6双水相萃取牛奶中酪蛋白条件的探索/201 实训7超临界二氧化碳萃取甘草黄酮/202 实训8盐析法分离小牛血清中IgG/204 实训9牛乳中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备/206 实训10离子交换树脂的预处理及交换容量的测定/208 实训11离子交换色谱分离氨基酸/210 实训12超滤法浓缩真菌多糖/213 实训13亲和色谱分离GST蛋白/215 实训14乳清蛋白脱盐(凝胶色谱法)/217 实训15分配色谱测定吐根中吐根碱和吐根酚碱/219 实训16Sephadex G50分离蓝色葡聚糖2000、细胞色素c 和溴酚蓝/221 实训17高效液相色谱测定葛根素含量/223 实训18聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)分离蛋白质/225 实训19蛋白质的透析/230 实训20蛋白质的真空浓缩/231 实训21酸奶粉冷冻干燥/233 实训19谷氨酸的浓缩与结晶/236 模块三　　单元集成技术实训 实训1四环素的提取(沉淀法)及含量测定/242 实训2细胞色素c粗品的制备及含量测定/246 实训3木瓜蛋白酶的分离与纯化及酶活力检测/248 实训4超氧化物歧化酶(SOD)的制备及活力测定/251 实训5从菠萝中提取菠萝蛋白酶/253 实训6甘露醇的制备及鉴定/255 实训7茶多酚的提取及含量测定/256 实训8异黄酮的提取与鉴定/258 实训9RNA的制备及纯度鉴定/263 实训10香菇多糖的提取与鉴定/265 实训11卵磷脂的提取与鉴定/267 实训12叶绿素的提取与分离/269 实训13桂花精油的提取和成分分析/271 实训14谷胱甘肽的制备及含量测定/273 实训15溶菌酶的提取与鉴定/275 实训17辅酶Q10的提取及含量测定/278 主要参考文献/281