植物分子生物学实验手册

本书以作者的教学和 科研实践为基础，对植物 分子生物学实验技术进行 了较为详细的介绍。全书 包括37个实验技术，分为 植物组织培养技术、植物 基因工程技术和分子生物 学高级技术三个部分，还 在附录部分列出常用载体 图谱和常用培养基等试剂 的配制方法。本书可以为 从事植物分子生物学研究 的科研人员和学生提供重 要的指导和帮助。

第一部分 植物组织培养技术 实验一 培养基的配制与灭菌 实验二 外植体的灭菌和接种 实验三 植物种子的无菌发苗 实验四 愈伤组织的诱导分化及植株的再生 实验五 植物器官花药的培养和单倍体植株的再生 实验六 植物茎尖分生组织的培养和无病毒苗的再生 实验七 植物原生质体的分离和培养 第二部分 植物基因工程技术 实验八 植物基因组DNA的提取 实验九 植物总RNA的提取 实验十 碱裂解法提取质粒DNA 实验十一 聚合酶链反应技术及引物设计 实验十二 cDNA末端快速扩增技术 实验十三 DNA限制性酶切 实验十四 DNA片段的凝胶回收与连接 实验十五 大肠杆菌感受态细胞的制备与遗传转化 实验十六 农杆菌感受态细胞的制备与遗传转化 实验十七 烟草的遗传转化(叶盘法) 实验十八 油菜的遗传转化 实验十九 棉花的遗传转化 实验二十 拟南芥的遗传转化 实验二十一 电击法遗传转化酵母细胞 实验二十二 利用实时荧光定量PCR检测基因表达水平 实验二十三 利用GUS染色方法检测基因表达水平 实验二十四 Southem杂交分析 实验二十五 转基因植株的western杂交分析 实验二十六 利用酶联免疫吸附试验的方法分析蛋白质的表达水平 实验二十七 植物材料石蜡切片的制作 实验二十八 植物材料的原位杂交分析 第三部分 分子生物学高级技术 实验二十九 在大肠杆菌中表达外源蛋白 实验三十 酵母单杂交技术 实验三十一 酵母双杂交技术 实验三十二 电泳迁移率变动分析技术 实验三十三 利用烟草进行双分子荧光互补分析 实验三十四 利用烟草观察蛋白质亚细胞定位 实验三十五 染色质免疫共沉淀测序技术 实验三十六 蛋白质Pull—down技术分析 实验三十七 双萤光素酶报告实验技术 主要参考文献 附录 附录1 各类分子生物学实验的常用载体与载体图谱 附录2 常用分子生物学培养基及缓冲液的配制方法 缩略语