生物化学综合实验(普通高等教育十三五规划教材)/生物科学生物技术系列

《生物化学综合实验》主要介绍了核酸类、蛋白质类、糖类、脂类以及维生素类五类生化物质的综合实验项目。本书侧重介绍核酸类、蛋白质类综合实验项目，如实验项目：真核生物的分子鉴定，细菌发育树构建与分析，精氨酸激酶和苹果酸脱氢酶的酶活性研究。由问题引入式的方法介绍每一项实验，激发学生的兴趣，每一类综合实验又包含多个供学生动手实践的具体实验。本书注重理论与实践的有机结合，内容简明、清晰，可操作性强。 本书主要适用于高等院校的生物技术、生物工程、生物制药、生物科学等专业教学使用，也可供生物化学相关研究人员参考。

谭志文，浙江万里学院，副教授，浙江万里学院。作者主要承担浙江万里学院生物技术、生物工程、生物制药专业的教学课程，主要包括：1.《生化实验技术》2011-2019； ；总学时：864。作者讲授《生物化学综合实验》，经过了一系列的建设过程，实现了“基础技能—综合应用设计—研发创新”三模块教学内容体系。2008年，该课程被列为“浙江省精品课程”进行建设；2009年，本课程被列为“国家精品课程”进行建设等。

绪论1 第一章核酸类综合实验5 项目一真核生物的分子鉴定5 实验一黄酒酵母形态学观察6 实验二黄酒酵母的分子生物学鉴定7 项目二原核生物——细菌的系统发育关系分析12 实验一细菌基因组的提取及琼脂糖凝胶电泳15 实验二细菌16S rDNA序列的PCR扩增16 实验三16S rDNA-ITS基因片段的纯化17 实验四16S rDNA重组载体的构建与转化19 实验五阳性克隆的筛选20 实验六系统发育树构建21 项目三全基因组的提取及效果评价——以火龙果为例27 实验一火龙果基因组的提取29 实验二火龙果基因组的ISSR PCR扩增31 项目四植物转基因成分的检测33 实验一大豆基因组的提取36 实验二定性PCR检测37 项目五真核生物RNA的提取及分析——以脊尾白虾为例40 实验一脊尾白虾的RNA提取41 实验二RNA电泳42 第二章蛋白质类综合实验45 项目一终止法测定酶活性——以酵母蔗糖酶为例45 项目二连续法测定酶活性——以碱性磷酸酶为例47 项目三细菌苹果酸脱氢酶的研究50 实验一苹果酸脱氢酶活力测定52 实验二苹果酸脱氢酶的提取纯化54 实验三苹果酸脱氢酶的电泳检测55 实验四苹果酸脱氢酶最适pH值的测定57 实验五苹果酸脱氢酶最适温度的测定57 实验六米氏常数及最大反应速度的测定58 项目四脊尾白虾精氨酸激酶的分离纯化与酶学性质研究60 实验一精氨酸激酶的提取与分离纯化60 实验二精氨酸激酶的活性测定63 实验三精氨酸激酶的酶学性质测定64 项目五鸡卵黄免疫球蛋白的分离纯化与活性测定66 实验一IgY粗品制备及纯化67 实验二蛋白质浓度测定（一）69 实验三蛋白质浓度测定（二）71 实验四免疫球蛋白的活性测定72 项目六固定化葡糖异构酶生产果葡糖浆及评价74 实验一固定化葡糖异构酶生产果葡糖浆75 实验二固定化葡糖异构酶的评价指标78 第三章糖类综合实验81 项目一海藻多糖研究81 实验一海藻多糖提取82 实验二海藻多糖的含量测定84 实验三还原糖的测定85 实验四海藻多糖的单糖成分分析88 实验五海藻多糖的红外光谱分析89 实验六多糖清除·OH能力测定90 实验七多糖的铁离子还原能力测定91 实验八多糖清除DPPH·能力测定92 项目二食用菌多糖的提取与分离纯化——以平菇为例94 第四章脂类综合实验——植物油脂的研究98 实验一杏仁油脂的提取101 实验二油脂皂化价的测定102 实验三油脂酸价的测定104 实验四油脂碘值的测定105 实验五油脂过氧化值的测定106 实验六油脂脂肪酸的气相色谱分析108 第五章维生素类综合实验110 项目一吡咯喹啉醌的研究110 实验一PQQ的提取纯化111 实验二PQQ的高效液相分析112 实验三NBT-Gly法测定PQQ含量113 项目二紫外分光光度法测定维生素C含量114 附录118 附录一常用仪器使用方法118 附录二常用缓冲溶液的配制方法127 附录三硫酸铵饱和度表133 附录四化学试剂规格134 参考文献136