治疗仔猪腹泻中药复方的筛选及应用

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董发明，河南科技大学教授，博士，兼任亚洲传统兽医学会理事，中国畜牧兽医学会中兽医学分会理事，中南六省（区）中西兽医结合研究会理事。从事中兽医学、猪病防治等教学研究30余年。先后主持完成河南省科技攻关项目“河南省规模化养猪场主要疫病调查及防制技术规范研究和推广”“专业化猪场主要传染病监控技术研究与推广”等。参加国家自然科学基金项目“兔脑炎原虫病的分子及免疫病理学研究”等的研究工作2项，取得国家发明专利3项，获省科技进步二等奖1项、三等奖3项。在《中国兽医杂志》《中国兽医学报》等刊物发表研究论文80余篇，出版专著10余部。

第一章 规模化猪场仔猪腹泻的发病情况调查 第一节 文献综述 1 一、仔猪流行性腹泻概况及研究进展 2 二、仔猪腹泻发病原因 5 三、仔猪腹泻的研究目的及意义 9 第二节 材料与方法 10 一、调查试验材料 10 二、调查试验方法及步骤 11 三、根据调查统计结果所采用的防治措施 12 第三节 结果与分析 14 一、规模化猪场仔猪腹泻调查统计结果与分析 14 二、仔猪腹泻非传染性因素的调查统计结果与分析 17 三、仔猪腹泻病理学检测结果与分析 20 四、规模化猪场仔猪腹泻的防治效果与分析 25 第四节 讨论 26 第五节 结论 28 第二章 猪源大肠杆菌综述 第一节 大肠杆菌概述 29 一、大肠杆菌的危害 31 二、大肠杆菌的致病机理 33 三、大肠杆菌的流行性特点 34 四、大肠杆菌的诊断 35 五、大肠杆菌耐药性的研究现状 36 六、致病性大肠杆菌的耐药机制 37 第二节 中药抗菌研究进展 39 一、中药抗菌制剂的研究 40 二、中药抗菌活性成分 42 三、中药抗菌的作用机制 44 四、中药防控耐药菌感染的优势 45 第三节 中药消除大肠杆菌耐药性的研究进展 46 一、中药单体消除大肠杆菌耐药性的研究进展 46 二、单味中药消除大肠杆菌耐药性的研究进展 47 三、复方中药消除大肠杆菌耐药性的研究进展 48 第四节 研究中药抗菌的目的和意义 49 第三章 规模化猪场大肠杆菌的耐药性检测分析 第一节 试验材料 53 一、材料来源 53 二、主要培养基 53 三、试验仪器准备 53 四、细菌微量生化鉴定管 54 五、主要药品 54 第二节 试验方法 55 一、主要培养基的配制 55 二、大肠杆菌的分离培养 55 三、大肠杆菌的革兰氏染色 56 四、大肠杆菌的生化鉴定 57 五、攻毒菌的培养 57 六、致病性试验 57 七、抗生素的药敏试验 58 八、单味中药的药敏试验 59 九、中药组方的药敏试验 59 第三节 结果 60 一、大肠杆菌分离培养结果 60 二、大肠杆菌生化鉴定结果 61 三、大肠杆菌染色和镜检 62 四、菌种保存 63 五、致病性试验结果 64 六、抗生素药敏试验结果 67 七、单味中药药敏试验结果 71 八、中药组方药敏试验结果 72 第四节 讨论与结论 74 第四章 规模化猪场大肠杆菌多重耐药菌耐药基因的检测 第一节 试验材料 77 一、试验用主要培养基 77 二、试验仪器 78 三、试验用主要试剂 78 四、试验主要检测耐药基因 78 五、PCR引物 79 第二节 方法 80 一、菌种保存及DNA提取 80 二、大肠杆菌耐药基因PCR扩增 82 第三节 结果 83 一、大肠杆菌耐药基因PCR扩增结果 83 二、耐药基因PCR产物测序结果 84 第四节 讨论与结论 92 第五章 中药对致病性大肠杆菌多重耐药菌的抑制试验 第一节 试验材料 95 一、试验用主要培养基 95 二、主要试验药物 95 三、试验用主要器材 95 四、试验受试菌株 96 第二节 试验方法 96 一、试验用主要培养基的配制 96 二、试验用中药提取液的准备 96 三、中西药联合体外抑菌试验 97 第三节 结果 98 第四节 讨论与结论 101 第六章 黄连等15种中药对猪源多重耐药大肠杆菌的抗菌活性试验 第一节 试验材料 106 一、细菌来源 106 二、试验用主要培养基 106 三、试验用主要仪器 106 四、试验用主要药品 107 第二节 试验方法 107 一、试验用主要培养基的配制 107 二、猪源多重耐药大肠杆菌复苏 108 三、试验用中药熬制 108 四、测定中药对猪源多重耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC) 109 第三节 结果 110 第四节 讨论与分析 112 第五节 结论 116 第七章 中药对猪源大肠杆菌aac(3)-Ⅱ耐药基因的消除作用 第一节 试验材料 118 一、试验材料来源 118 二、主要药品及试剂 118 三、试验主要仪器 118 第二节 试验步骤 119 一、耐药基因消除试验 119 二、试验引物设计 120 三、试验总RNA的提取与检测 120 四、反转录试验 121 五、实时荧光定量PCR反应 122 第三节 结果 123 一、电泳结果 123 二、试验溶解曲线 124 三、试验扩增曲线 124 四、中药消除aac(3)-Ⅱ基因的效果比较 126 五、中药消除aac (3)-Ⅱ基因的作用规律 127 第四节 讨论与分析 129 第五节 结论 131 第八章 中药对猪源大肠杆菌耐药消除作用的体外观察 第一节 材料与方法 134 一、试验材料 134 二、试验步骤 135 第二节 结果 137 第三节 讨论与分析 140 第四节 结论 142 第九章 芩黄颗粒的制备及质量检测 第一节 概述 143 一、中药颗粒的概述 143 二、中药颗粒的具体应用 147 三、国内外研究现状 150 四、本研究的目的与意义 152 第二节 材料与方法 153 一、芩黄颗粒的制备 153 二、芩黄颗粒的质量检测 158 第三节 结果与分析 161 第四节 讨论 164 第五节 结论 166 第十章 银黄可溶性粉的制备及体外抑菌试验 第一节 概述 167 一、抗生素在兽医临床上的使用 167 二、中药在兽医学方面的应用与发展 169 第二节 材料和方法 175 一、试验材料 175 二、试验方法 176 第三节 结果 182 一、银黄可溶性粉的鉴别及含量测定结果 182 二、银黄可溶性粉药敏试验结果 184 第四节 讨论 185 一、银黄提取工艺的探讨 185 二、银黄抑菌效果的讨论 188 三、各因素对抑菌效果的影响 189 第五节 结论 190 第十一章 中药在防治猪腹泻上的应用 第一节 在猪消化不良型腹泻防治上的应用 192 第二节 在猪细菌性腹泻防治上的应用 194 第三节 在猪病毒性腹泻防治上的应用 197 一、猪流行性腹泻(PED)中兽医发病机理 199 二、中药体外抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的作用 200 三、中药防治PED的临床应用 201 四、中药抗PED的作用机制 203 第四节 在猪寄生虫性腹泻防治上的应用 206 第五节 在其他原因导致的腹泻防治上的应用 211 第十二章 治疗仔猪腹泻中药复方的筛选及应用结论与创新 参考文献